GP2D

GP2dは、低分化型結腸腫瘍由来のヒト結腸直腸腺癌細胞株である。これは、同じ腺癌検体から姉妹株であるGPSdとともに樹立された。両株とも、10q11-q21領域の逆位重複を含む、結腸直腸癌で一般的に見られるパターンと一致する類似の遺伝的変異を共有しているが、表現型の特徴や細胞の挙動においては著しい違いが見られる。 特に、この染色体領域にマッピングされているretプロオントジーンを伴う転座は、サザンブロット解析によって検出されなかったことから、この重複がこの遺伝子を直接破壊しなかったことが示唆される。

GP2d細胞は、微小コロニーの縁から凝集して広がる増殖パターンを示し、密接に結合した上皮単層を形成する。この形態には、α2-インテグリン、デスモプラキン、E-カドヘリンといった接着分子の明確な発現パターンが伴っており、これらはすべて上皮の完全性を維持する役割を果たしている。 機能的には、GP2d細胞は上皮成長因子（EGF）、トランスフォーミング成長因子-α（TGFα）、およびインスリンに強力に応答し、これらのリガンドに対する細胞増殖の増加によって実証されている。 興味深いことに、GP2d細胞とGPSd細胞は同程度の数のEGF受容体を発現しているが、EGF受容体リガンドの発現には違いが見られる。GP2d細胞はアンフィレグリンmRNAを豊富に有する一方、GPSd細胞はアンフィレグリンがほとんどまたは全く発現せず、主にTGFαmRNAを発現しており、これは観察された生物学的応答の違いと相関している。

これらの特徴により、GP2dは結腸直腸癌における成長因子シグナル伝達および細胞接着の制御を研究するための貴重なモデルとなっている。EGF経路の刺激に対する反応性と特徴的な上皮形態は、腫瘍細胞の分化および増殖を調査する上での有用性を際立たせている。さらに、GPSdとの共通の起源により、特にリガンド-受容体ダイナミクスおよび上皮間葉転換（EMT）反応の文脈において、腫瘍内のクローン変異に関する比較研究が可能となる。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。