GP2D

A GP2d é uma linha celular de adenocarcinoma colorretal humano derivada de um tumor do cólon pouco diferenciado. Foi estabelecida em conjunto com uma linha irmã, a GPSd, a partir da mesma amostra de adenocarcinoma. Embora ambas as linhas partilhem alterações genéticas semelhantes, consistentes com padrões comuns observados no cancro colorretal, incluindo uma duplicação invertida envolvendo o cromossoma 10q11-q21, diferem significativamente nas suas características fenotípicas e no comportamento celular. Notavelmente, não foram detetadas translocações envolvendo o proto-oncogene ret — mapeado para esta região cromossómica — através da análise Southern blot, sugerindo que a duplicação não perturbou este gene diretamente.

As células GP2d exibem um padrão de crescimento coeso e difuso a partir das bordas das microcolónias para formar uma monocamada epitelial confluente. Esta morfologia é acompanhada por padrões de expressão distintos de moléculas de adesão, tais como a integrina α2, a desmoplaquina e a E-caderina, todas elas desempenhando papéis na manutenção da integridade epitelial. Funcionalmente, as células GP2d respondem de forma robusta ao fator de crescimento epidérmico (EGF), ao fator de crescimento transformador alfa (TGFα) e à insulina, conforme demonstrado pelo aumento da proliferação celular em resposta a estes ligantes. Curiosamente, tanto as GP2d como as GPSd expressam números comparáveis de recetores de EGF, mas diferem na sua expressão de ligantes dos recetores de EGF. As células GP2d têm mRNA de anfiregulina abundante, enquanto as GPSd expressam predominantemente mRNA de TGFα com pouca ou nenhuma anfiregulina, o que se correlaciona com as diferentes respostas biológicas observadas.

Estas características tornam o GP2d um modelo valioso para estudar a regulação da sinalização dos fatores de crescimento e a adesão celular no cancro colorretal. A sua capacidade de resposta aos estímulos da via do EGF e a morfologia epitelial distinta destacam a sua utilidade na investigação da diferenciação e proliferação das células tumorais. Além disso, a origem comum com o GPSd permite estudos comparativos da variação clonal dentro dos tumores, particularmente no contexto da dinâmica ligando-receptor e das respostas de transição epitelial-mesenquimal (EMT).

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia