GP2D

GP2d je lidská buněčná linie kolorektálního adenokarcinomu odvozená z málo diferencovaného nádoru tlustého střeva. Byla vytvořena společně se sesterskou linií GPSd ze stejného vzorku adenokarcinomu. Ačkoli obě linie vykazují podobné genetické změny odpovídající běžným vzorcům pozorovaným u kolorektálního karcinomu, včetně inverzní duplikace zahrnující chromozom 10q11–q21, výrazně se liší ve svých fenotypových charakteristikách a buněčném chování. Je pozoruhodné, že Southernovou blotovou analýzou nebyly detekovány žádné translokace zahrnující protoonkogen ret – mapovaný do této chromozomální oblasti –, což naznačuje, že duplikace tento gen přímo nenarušila.

Buňky GP2d vykazují soudržný, rozšiřující se růstový vzorec od okrajů mikrokolonií, čímž tvoří konfluentní epiteliální monovrstvu. Tato morfologie je doprovázena odlišnými expresními vzorci adhezních molekul, jako jsou α2-integrin, desmoplakin a E-kadherin, z nichž všechny hrají roli v udržování epiteliální integrity. Z funkčního hlediska buňky GP2d silně reagují na epidermální růstový faktor (EGF), transformující růstový faktor alfa (TGFα) a inzulín, jak dokazuje zvýšená buněčná proliferace v reakci na tyto ligandy. Zajímavé je, že jak GP2d, tak GPSd exprimují srovnatelné množství receptorů EGF, liší se však v expresi ligandů receptorů EGF. Buňky GP2d mají hojné množství mRNA amfiregulinu, zatímco GPSd exprimuje převážně mRNA TGFα s malým nebo žádným množstvím amfiregulinu, což koreluje s pozorovanými odlišnými biologickými reakcemi.

Tyto vlastnosti činí z GP2d cenný model pro studium regulace signalizace růstových faktorů a buněčné adheze u kolorektálního karcinomu. Jeho citlivost na podněty EGF dráhy a odlišná epiteliální morfologie zdůrazňují jeho užitečnost při zkoumání diferenciace a proliferace nádorových buněk. Společný původ s GPSd navíc umožňuje srovnávací studie klonální variability v rámci nádorů, zejména v kontextu dynamiky ligand-receptor a reakcí epiteliálně-mezenchymální transformace (EMT).

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení