الانتقال إلى المحتوى
GP2D
الأنسجة
القولون
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
Gp2d, Gp2D, GP2D

المستندات

GP2D

Cell line · رقم المنتج 305778

GP2d is a human colorectal adenocarcinoma cell line derived from a poorly differentiated colon tumor. It was established alongside a sister line, GPSd, fr...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

GP2d هو خط خلوي لسرطان الغدة الدرقية القولوني البشري مستمد من ورم في القولون ضعيف التمايز. وقد تم إنشاؤه جنبًا إلى جنب مع خط خلوي شقيق، هو GPSd، من نفس عينة سرطان الغدة الدرقية. ورغم أن كلا الخطين يشتركان في تغيرات جينية متشابهة تتوافق مع الأنماط الشائعة في سرطان القولون والمستقيم، بما في ذلك تكرار معكوس يشمل الكروموسوم 10q11-q21، إلا أنهما يختلفان بشكل ملحوظ في خصائصهما الظاهرية وسلوكهما الخلوي. والجدير بالذكر أنه لم يتم الكشف عن أي انتقالات تتضمن الجين الأولي المسرطن ret - المخطط لهذه المنطقة الكروموسومية - من خلال تحليل Southern blot، مما يشير إلى أن التكرار لم يعطل هذا الجين بشكل مباشر.

تُظهر خلايا GP2d نمط نمو متماسك ومنتشر من حواف المستعمرات الدقيقة لتشكل طبقة أحادية متدفقة من الخلايا الظهارية. ويصاحب هذه المورفولوجيا أنماط تعبير مميزة لجزيئات الالتصاق مثل α2-integrin و desmoplakin و E-cadherin، والتي تلعب جميعها أدوارًا في الحفاظ على سلامة الظهارة. من الناحية الوظيفية، تستجيب خلايا GP2d بقوة لعامل النمو البشري (EGF)، وعامل النمو المحول ألفا (TGFα)، والأنسولين، كما يتضح من زيادة تكاثر الخلايا استجابة لهذه الروابط. ومن المثير للاهتمام أن كل من GP2d و GPSd يعبران عن أعداد متشابهة من مستقبلات EGF، لكنهما يختلفان في تعبيرهما عن ليجاندات مستقبلات EGF. تحتوي خلايا GP2d على كمية وفيرة من mRNA للأمفيريجولين، في حين تعبر خلايا GPSd بشكل أساسي عن mRNA لـ TGFα مع القليل من الأمفيريجولين أو بدونه، وهو ما يرتبط بالاستجابات البيولوجية المختلفة التي لوحظت.

تجعل هذه الميزات من GP2d نموذجًا قيمًا لدراسة تنظيم إشارات عامل النمو والتصاق الخلايا في سرطان القولون والمستقيم. وتسلط استجابتها لمحفزات مسار EGF ومورفولوجيا الظهارة المميزة الضوء على فائدتها في دراسة تمايز الخلايا السرطانية وتكاثرها. علاوة على ذلك، يسمح الأصل المشترك مع GPSd بإجراء دراسات مقارنة للتباين النسيلي داخل الأورام، لا سيما في سياق ديناميكيات الارتباط والمستقبلات واستجابات الانتقال من الظهارة إلى اللحمة (EMT).

الأنسجة
القولون
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
  • Gp2d
  • Gp2D
  • GP2D

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03المعرّفات

المرجع
GP2D (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305778)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_2450

04التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
الطفرة: KRAS، بسيطة، p.Gly12Asp (c.35G>A)، متغايرة الزيجوت، TP53

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
71 سنة
الأصل العرقي
قوقازي