GP2D

GP2d on ihmisen paksusuolen adenokarsinoomasta peräisin oleva solulinja, joka on johdettu huonosti erilaistuneesta paksusuolen kasvaimesta. Se perustettiin yhdessä sisarlinjan GPSd:n kanssa samasta adenokarsinoomanäytteestä. Vaikka molemmilla linjoilla on samankaltaisia geneettisiä muutoksia, jotka ovat tyypillisiä paksusuolisyövälle, mukaan lukien kromosomin 10q11–q21 käänteinen duplikaatio, ne eroavat toisistaan selvästi fenotyyppisten ominaisuuksiensa ja solujen käyttäytymisensä suhteen. Merkittävästi, Southern-blot-analyysissä ei havaittu translokaatioita, joihin olisi liittynyt ret-proto-onkogeeni – joka on kartoitettu tälle kromosomialueelle – mikä viittaa siihen, että duplikaatio ei häirinnyt tätä geeniä suoraan.

GP2d-solut osoittavat yhtenäistä, leviävää kasvumallia mikrokolonioiden reunoilta muodostaen yhtenäisen epiteelimonokerroksen. Tähän morfologiaan liittyy selkeitä ilmentymismalleja adheesiomolekyyleille, kuten α2-integrinille, desmoplakinille ja E-kadheriinille, jotka kaikki vaikuttavat epiteelin eheyden ylläpitämiseen. Toiminnallisesti GP2d-solut reagoivat voimakkaasti epidermaaliselle kasvutekijälle (EGF), transformoivalle kasvutekijälle alfa (TGFα) ja insuliinille, mikä näkyy solujen lisääntyneenä proliferaationa vasteena näille ligandeille. Mielenkiintoista on, että sekä GP2d- että GPSd-solut ilmentävät vertailukelpoisen määrän EGF-reseptoreita, mutta eroavat toisistaan EGF-reseptoriligandien ilmentymisessä. GP2d-soluissa on runsaasti amfireguliini-mRNA:ta, kun taas GPSd-solut ilmentävät pääasiassa TGFα-mRNA:ta ja vain vähän tai ei lainkaan amfireguliinia, mikä korreloi havaittujen erilaisten biologisten vasteiden kanssa.

Nämä ominaisuudet tekevät GP2d:stä arvokkaan mallin kasvutekijäsignaloinnin ja solujen adheesion säätelyn tutkimiseen kolorektaalisyövässä. Sen reagointikyky EGF-reitin ärsykkeisiin ja erottuva epiteelimorfologia korostavat sen hyödyllisyyttä tuumorisolujen erilaistumisen ja proliferaation tutkimuksessa. Lisäksi yhteinen alkuperä GPSd:n kanssa mahdollistaa vertailututkimukset klonaalisesta variaatiosta tuumoreissa, erityisesti ligandi-reseptori-dynamiikan ja epiteeli-mesenkymaalisuuntautuneen siirtymän (EMT) vasteiden kontekstissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa