GP2D

GP2d on inimese kolorektaalse adenokartsinoomi rakuliin, mis on saadud halvasti diferentseerunud käärsoolekasvajast. See loodi koos sama adenokartsinoomi proovist pärineva sõsarliiniga GPSd. Kuigi mõlemal liinil on sarnased geneetilised muutused, mis vastavad kolorektaalse vähi puhul tavaliselt esinevatele mustritele, sealhulgas kromosoomi 10q11–q21 pööratud duplikatsioon, erinevad need märkimisväärselt oma fenotüübiliste omaduste ja rakkude käitumise poolest. Tähelepanuväärne on, et Southern-blot-analüüsiga ei avastatud ühtegi translokatsiooni, mis hõlmaks ret-protoonkogeeni – mis on kaardistatud sellesse kromosoomipiirkonda –, mis viitab sellele, et duplikatsioon ei häirinud seda geeni otseselt.

GP2d-rakud näitavad ühtset, laienevat kasvumustrit mikrokolonite servadest, moodustades konfluentse epiteelmonokihi. Seda morfoloogiat saadab adheesioonimolekulide, nagu α2-integrin, desmoplakiin ja E-kadheriin, selge ekspressioonimuster, millest kõik mängivad rolli epiteeli terviklikkuse säilitamisel. Funktsionaalselt reageerivad GP2d-rakud tugevalt epidermaalse kasvufaktori (EGF), transformatiivse kasvufaktori alfa (TGFα) ja insuliinile, mida näitab rakkude proliferatsiooni suurenemine vastusena nendele ligandidele. Huvitaval kombel ekspresseerivad nii GP2d kui ka GPSd võrreldavat arvu EGF-retseptoreid, kuid erinevad EGF-retseptori ligandide ekspressioonis. GP2d-rakkudes on rohkesti amfireguliini mRNA-d, samas kui GPSd ekspresseerib peamiselt TGFα mRNA-d, amfireguliini on vähe või üldse mitte, mis korrelatsioonis on täheldatud erinevate bioloogiliste reaktsioonidega.

Need omadused teevad GP2d-st väärtusliku mudeli kasvufaktori signaalimise ja rakkude adhesiivsuse regulatsiooni uurimiseks kolorektaalvähis. Selle reageerimisvõime EGF-signaalitee stiimulitele ja eristuv epiteelimorfoloogia rõhutavad selle kasulikkust kasvajarakkude diferentseerumise ja proliferatsiooni uurimisel. Lisaks võimaldab ühine päritolu GPSd-ga teha võrdlevaid uuringuid kloonilise variatsiooni kohta kasvajate sees, eriti ligandi-retseptori dünaamika ja epiteelist mesenküümiks ülemineku (EMT) reaktsioonide kontekstis.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest