GP2D

GP2d — це лінія клітин аденокарциноми товстої кишки людини, отримана з низькодиференційованої пухлини товстої кишки. Вона була створена разом із сестринською лінією GPSd на основі того самого зразка аденокарциноми. Хоча обидві лінії мають схожі генетичні зміни, що відповідають типовим для колоректального раку ознакам, зокрема інвертовану дуплікацію в ділянці хромосоми 10q11-q21, вони суттєво відрізняються за фенотипними характеристиками та клітинною поведінкою. Примітно, що за допомогою аналізу Саузерн-блот не було виявлено жодних транслокацій, що зачіпають протоонкоген ret, локалізований у цій хромосомній ділянці, що свідчить про те, що дуплікація безпосередньо не порушила функцію цього гена.

Клітини GP2d демонструють когезивний, розтікаючийся тип росту від країв мікроколоній, утворюючи злитий епітеліальний моношар. Ця морфологія супроводжується характерними паттернами експресії молекул адгезії, таких як α2-інтегрин, десмоплакін та Е-кадгерин, які відіграють роль у підтримці цілісності епітелію. Функціонально клітини GP2d активно реагують на епідермальний фактор росту (EGF), трансформуючий фактор росту-альфа (TGFα) та інсулін, про що свідчить посилення клітинної проліферації у відповідь на ці ліганди. Цікаво, що як GP2d, так і GPSd експресують порівнянну кількість рецепторів EGF, але відрізняються за експресією лігандів рецепторів EGF. Клітини GP2d мають велику кількість мРНК амфірегуліну, тоді як GPSd переважно експресують мРНК TGFα з незначною кількістю або взагалі без амфірегуліну, що корелює з різними біологічними реакціями, які спостерігаються.

Ці особливості роблять GP2d цінною моделлю для вивчення регуляції сигналізації факторів росту та клітинної адгезії при колоректальному раку. Її чутливість до стимулів шляху EGF та виражена епітеліальна морфологія підкреслюють її корисність у дослідженні диференціації та проліферації пухлинних клітин. Крім того, спільне походження з GPSd дозволяє проводити порівняльні дослідження клональної варіації всередині пухлин, особливо в контексті динаміки ліганд-рецептор та реакцій епітеліально-мезенхімального переходу (EMT).

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>