GP2D

GP2d, düşük derecede farklılaşmış bir kolon tümöründen elde edilen bir insan kolorektal adenokarsinom hücre hattıdır. Bu hücre hattı, aynı adenokarsinom örneğinden elde edilen kardeş bir hücre hattı olan GPSd ile birlikte oluşturulmuştur. Her iki hücre hattı da, 10q11-q21 kromozomunu içeren tersine dönmüş bir duplikasyon da dahil olmak üzere, kolorektal kanserde sıklıkla görülen tipik genetik değişiklikleri paylaşsa da, fenotipik özellikleri ve hücresel davranışları açısından belirgin farklılıklar göstermektedir. Özellikle, bu kromozom bölgesine haritalanan ret proto-onkogenini içeren hiçbir translokasyon Southern blot analizi ile tespit edilmemiştir; bu da, duplikasyonun bu geni doğrudan bozmadığını düşündürmektedir.

GP2d hücreleri, mikrokolonilerin kenarlarından yayılan, kohezyonlu bir büyüme paterni sergileyerek, birleşik bir epitelyal tek tabaka oluşturur. Bu morfolojiye, epitelyal bütünlüğün korunmasında rol oynayan α2-integrin, desmoplakin ve E-kadherin gibi adhezyon moleküllerinin belirgin ekspresyon paternleri eşlik eder. İşlevsel olarak, GP2d hücreleri epidermal büyüme faktörü (EGF), transformasyon büyüme faktörü-alfa (TGFα) ve insüline güçlü bir şekilde yanıt verir; bu durum, bu ligandlara yanıt olarak artan hücre proliferasyonu ile kanıtlanmıştır. İlginç bir şekilde, hem GP2d hem de GPSd benzer sayıda EGF reseptörü eksprese eder, ancak EGF reseptör ligandlarının ekspresyonunda farklılık gösterir. GP2d hücreleri bol miktarda amfiregulin mRNA'sına sahipken, GPSd ağırlıklı olarak TGFα mRNA'sını eksprese eder ve amfiregulin çok azdır veya hiç yoktur; bu durum, gözlemlenen farklı biyolojik yanıtlarla tutarlıdır.

Bu özellikler, GP2d'yi kolorektal kanserde büyüme faktörü sinyal iletiminin ve hücre yapışmasının düzenlenmesini incelemek için değerli bir model haline getirmektedir. EGF yolak uyarıcılarına verdiği yanıt ve kendine özgü epitel morfolojisi, tümör hücresi farklılaşması ve çoğalmasını araştırmada yararını vurgulamaktadır. Ayrıca, GPSd ile ortak kökeni, özellikle ligand-reseptör dinamikleri ve epitel-mezenkimal geçiş (EMT) yanıtları bağlamında, tümörler içindeki klonal varyasyonun karşılaştırmalı çalışmalarına olanak sağlamaktadır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın