GP2D

GP2d เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมาของมนุษย์ที่ได้มาจากเนื้องอกลำไส้ใหญ่ที่มีการแยกตัวต่ำ สายพันธุ์นี้ถูกสร้างขึ้นพร้อมกับสายพันธุ์พี่น้องคือ GPSd จากตัวอย่างอะดีโนคาร์ซิโนมาเดียวกัน แม้ว่าทั้งสองสายพันธุ์จะมีการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมที่คล้ายคลึงกันซึ่งสอดคล้องกับรูปแบบที่พบได้บ่อยในมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก รวมถึงการซ้ำซ้อนแบบกลับด้านที่เกี่ยวข้องกับโครโมโซม 10q11-q21 แต่พวกมันมีความแตกต่างอย่างชัดเจนในด้านลักษณะทางฟีโนไทป์และพฤติกรรมของเซลล์ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ไม่พบการเคลื่อนย้ายที่เกี่ยวข้องกับยีนต้นแบบของโปรตีนที่ก่อให้เกิดมะเร็ง (ret proto-oncogene) ซึ่งถูกกำหนดตำแหน่งในบริเวณโครโมโซมนี้ โดยการวิเคราะห์ด้วยวิธี Southern blot ซึ่งบ่งชี้ว่าการซ้ำซ้อนนี้ไม่ได้รบกวนยีนดังกล่าวโดยตรง

เซลล์ GP2d แสดงรูปแบบการเจริญเติบโตที่เหนียวแน่นและแผ่ขยายจากขอบของไมโครโคโลนีเพื่อสร้างชั้นเดียวของเซลล์เยื่อบุผิวที่เชื่อมต่อกัน รูปร่างนี้มาพร้อมกับรูปแบบการแสดงออกที่ชัดเจนของโมเลกุลยึดเกาะ เช่น α2-integrin, desmoplakin และ E-cadherin ซึ่งทั้งหมดนี้มีบทบาทในการรักษาความสมบูรณ์ของเยื่อบุผิว ในเชิงหน้าที่ เซลล์ GP2d ตอบสนองต่อปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGF), ปัจจัยการเจริญเติบโตของเนื้อเยื่อ (TGFα), และอินซูลินอย่างชัดเจน ซึ่งแสดงให้เห็นจากการเพิ่มจำนวนเซลล์ที่ตอบสนองต่อลิแกนด์เหล่านี้ ที่น่าสนใจคือ ทั้ง GP2d และ GPSd แสดงจำนวนตัวรับ EGF ที่ใกล้เคียงกัน แต่มีความแตกต่างในการแสดงออกของลิแกนด์ตัวรับ EGF โดยเซลล์ GP2d มี mRNA ของแอมฟิเรกูลินในปริมาณมาก ในขณะที่ GPSd แสดงออก mRNA ของ TGFα เป็นหลัก โดยมีแอมฟิเรกูลินน้อยมากหรือไม่มีเลย ซึ่งสอดคล้องกับการตอบสนองทางชีวภาพที่แตกต่างกันที่พบ

คุณลักษณะเหล่านี้ทำให้ GP2d เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการควบคุมการส่งสัญญาณของปัจจัยการเจริญเติบโตและการยึดเกาะของเซลล์ในมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก ความไวต่อการกระตุ้นจากเส้นทาง EGF และลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวที่แตกต่างชัดเจนเน้นย้ำถึงประโยชน์ในการศึกษาการแยกแยะและการเพิ่มจำนวนของเซลล์มะเร็ง นอกจากนี้ การมีต้นกำเนิดร่วมกันกับ GPSd ยังเอื้อต่อการศึกษาเปรียบเทียบความแปรผันของโคลนภายในเนื้องอก โดยเฉพาะในบริบทของพลวัตของลิแกนด์-ตัวรับและการตอบสนองต่อการเปลี่ยนผ่านจากเยื่อบุผิวไปเป็นเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (EMT)

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.