GP2D

A GP2d egy rosszul differenciált vastagbél-daganatból származó humán kolorektális adenokarcinóma sejtvonal. Ugyanabból az adenokarcinóma-mintából hozták létre egy testvérvonalat, a GPSd-t is. Noha mindkét vonal hasonló genetikai eltéréseket mutat, amelyek összhangban állnak a kolorektális rákban gyakran megfigyelt mintázatokkal – ideértve a 10q11–q21 kromoszómát érintő fordított duplikációt is –, fenotípusos jellemzőik és sejtviselkedésük tekintetében jelentősen eltérnek egymástól. Érdemes megjegyezni, hogy a Southern-blot analízis során nem mutattak ki olyan transzlokációt, amely a kromoszómális régióba térképezett ret proto-onkogént érintette volna, ami arra utal, hogy a duplikáció nem zavarta meg közvetlenül ezt a gént.

A GP2d sejtek kohezív, terjedő növekedési mintázatot mutatnak a mikrokolóniák széleitől kiindulva, és konfluens epiteliális monoréteget képeznek. Ezt a morfológiát az adhéziós molekulák – például az α2-integrin, a desmoplakin és az E-kadherin – jellegzetes expressziós mintázata kíséri, amelyek mindegyike szerepet játszik az epiteliális integritás fenntartásában. Funkcionálisan a GP2d sejtek erőteljesen reagálnak az epidermális növekedési faktorra (EGF), a transzformáló növekedési faktor-alfára (TGFα) és az inzulinra, amit a ezekre a ligandumokra adott válaszként megnövekedett sejtproliferáció bizonyít. Érdekes módon mind a GP2d, mind a GPSd hasonló számú EGF-receptort fejez ki, de az EGF-receptor ligandok expressziójában különböznek egymástól. A GP2d sejtekben bőségesen található amphiregulin mRNS, míg a GPSd sejtek túlnyomórészt TGFα mRNS-t fejeznek ki, alig vagy egyáltalán nem tartalmaznak amphiregulint, ami összefüggésben áll a megfigyelt eltérő biológiai válaszokkal.

Ezek a jellemzők a GP2d-t értékes modellé teszik a növekedési faktor jelátvitel és a sejtadhézió szabályozásának vizsgálatához a kolorektális rákban. Az EGF-útvonal stimulusaival szembeni reagálóképessége és jellegzetes epiteliális morfológiája kiemeli hasznosságát a tumorsejtek differenciálódásának és proliferációjának vizsgálatában. Továbbá a GPSd-vel közös eredet lehetővé teszi a tumorokon belüli klonális variációk összehasonlító vizsgálatát, különösen a ligand-receptor dinamika és az epiteliális-mesenchimális átalakulás (EMT) reakciók kontextusában.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban