GP2D

GP2d – tai žmogaus storosios žarnos adenokarcinomos ląstelių linija, gauta iš menkai diferencijuoto storosios žarnos naviko. Ji buvo sukurta kartu su gimininga linija GPSd iš to paties adenokarcinomos mėginio. Nors abi linijos turi panašių genetinių pokyčių, atitinkančių tipinius storosios žarnos vėžiui būdingus modelius, įskaitant inversinę duplikaciją 10q11–q21 chromosomos srityje, jos labai skiriasi savo fenotipinėmis savybėmis ir ląstelių elgsena. Pažymėtina, kad Southern blot analize nebuvo aptikta jokių translokacijų, susijusių su ret protoonkogenu, priskirtu šiam chromosomų regionui, o tai rodo, kad duplikacija tiesiogiai nesutrikdė šio geno.

GP2d ląstelės rodo nuoseklų, plintantį augimo modelį nuo mikrokolonijų kraštų, kad susidarytų susiliejantis epitelio monosluoksnis. Šią morfologiją lydi aiškūs adhezijos molekulių, tokių kaip α2-integrinas, desmoplakinas ir E-kadherinas, ekspresijos modeliai, kurie visi vaidina vaidmenį palaikant epitelio vientisumą. Funkciniu požiūriu GP2d ląstelės stipriai reaguoja į epiderminį augimo faktorių (EGF), transformuojantį augimo faktorių alfa (TGFα) ir insuliną, kaip rodo padidėjęs ląstelių proliferacijos lygis reaguojant į šiuos ligandus. Įdomu tai, kad tiek GP2d, tiek GPSd išreiškia panašų skaičių EGF receptorių, tačiau skiriasi EGF receptorių ligandų išraiška. GP2d ląstelėse gausu amfiregulino mRNR, o GPSd išreiškia daugiausia TGFα mRNR, beveik arba visai neturėdamos amfiregulino, o tai koreliuoja su stebimais skirtingais biologiniais atsakymais.

Šios savybės daro GP2d vertingą modelį augimo faktorių signalizacijos ir ląstelių adhezijos reguliavimo tyrimams storosios žarnos vėžio atveju. Jos reaktyvumas į EGF kelio stimuliatorius ir išskirtinė epitelio morfologija pabrėžia jos naudą tiriant naviko ląstelių diferenciaciją ir proliferaciją. Be to, bendra kilmė su GPSd leidžia atlikti lyginamuosius navikų vidinių kloninių variacijų tyrimus, ypač ligandų-receptorių dinamikos ir epitelio-mezenchiminio perėjimo (EMT) reakcijų kontekste.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime