GP2D

GP2d er en human cellelinje fra et kolorektalt adenokarcinom, der stammer fra en dårligt differentieret tyktarmstumor. Den blev etableret sideløbende med en søsterlinje, GPSd, fra samme adenokarcinomprøve. Selvom begge linjer deler lignende genetiske ændringer, der stemmer overens med de almindelige mønstre, der ses ved kolorektal cancer – herunder en inverteret duplikation på kromosom 10q11-q21 – adskiller de sig markant i deres fænotypiske egenskaber og cellulære adfærd. Det er bemærkelsesværdigt, at der ikke blev påvist nogen translokationer involverende ret-proto-onkogenet – kortlagt til denne kromosomregion – ved Southern-blot-analyse, hvilket tyder på, at duplikationen ikke forstyrrede dette gen direkte.

GP2d-celler udviser et sammenhængende, spredende vækstmønster fra kanterne af mikrokolonier for at danne et konfluent epitelmonolag. Denne morfologi ledsages af tydelige ekspressionsmønstre for adhæsionsmolekyler såsom α2-integrin, desmoplakin og E-cadherin, som alle spiller en rolle i opretholdelsen af epitelintegriteten. Funktionelt reagerer GP2d-celler kraftigt på epidermal vækstfaktor (EGF), transformerende vækstfaktor-alfa (TGFα) og insulin, hvilket demonstreres ved øget celleproliferation som reaktion på disse ligander. Interessant nok udtrykker både GP2d og GPSd sammenlignelige antal EGF-receptorer, men adskiller sig i deres ekspression af EGF-receptorligander. GP2d-celler har rigeligt med amphiregulin-mRNA, mens GPSd overvejende udtrykker TGFα-mRNA med lidt eller ingen amphiregulin, hvilket korrelerer med de observerede forskellige biologiske responser.

Disse egenskaber gør GP2d til en værdifuld model til at studere reguleringen af vækstfaktorsignalering og celleadhæsion i kolorektal cancer. Dens reaktionsevne over for stimuli fra EGF-signalvejen og den særlige epitelmorfologi understreger dens nytteværdi i undersøgelsen af tumorcelledifferentiering og -proliferation. Desuden muliggør den fælles oprindelse med GPSd sammenlignende studier af klonal variation inden for tumorer, især i sammenhæng med ligand-receptordynamik og epitel-til-mesenkym-overgangsreaktioner (EMT).

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring