GP2D

GP2d je človeška celična linija kolorektalnega adenokarcinoma, pridobljena iz slabo diferenciranega tumorja debelega črevesa. Ustanovljena je bila skupaj s sestersko linijo GPSd iz istega vzorca adenokarcinoma. Čeprav imata obe liniji podobne genetske spremembe, ki ustrezajo običajnim vzorcem pri kolorektalnem raku, vključno z inverzno duplikacijo na kromosomu 10q11–q21, se med seboj močno razlikujeta po fenotipskih značilnostih in celičnem obnašanju. Zlasti je pomembno, da s Southern-blot analizo niso bile ugotovljene nobene translokacije, ki bi vključevale protoonkogen ret – kartiran v tem kromosomskem območju –, kar kaže, da podvojitev tega gena ni neposredno motila.

Celice GP2d kažejo koheziven, razširjen vzorec rasti od robov mikrokolonij, da tvorijo konfluentno epitelno monosloj. To morfologijo spremljajo izraziti vzorci izražanja adhezijskih molekul, kot so α2-integrin, desmoplakin in E-kadherin, ki vse igrajo vlogo pri ohranjanju epitelne integritete. Funkcionalno se celice GP2d močno odzivajo na epidermalni rastni faktor (EGF), transformirajoči rastni faktor alfa (TGFα) in inzulin, kar dokazuje povečana celična proliferacija v odzivu na te ligande. Zanimivo je, da tako GP2d kot GPSd izražata primerljivo število receptorjev EGF, vendar se razlikujeta v izražanju ligandov receptorjev EGF. Celice GP2d imajo obilo mRNA amfiregulina, medtem ko GPSd pretežno izraža mRNA TGFα z malo ali brez amfiregulina, kar je v skladu z opazovanimi različnimi biološkimi odzivi.

Te značilnosti naredijo GP2d za dragocen model za preučevanje regulacije signalizacije rastnih faktorjev in celične adhezije pri kolorektalnem raku. Njegova odzivnost na dražljaje poti EGF in izrazita epitelijska morfologija poudarjata njegovo uporabnost pri preučevanju diferenciacije in proliferacije tumorskih celic. Poleg tega skupni izvor z GPSd omogoča primerjalne študije klonskih variacij znotraj tumorjev, zlasti v kontekstu dinamike ligand-receptor in odzivov epitelijsko-mezenhimalne tranzicije (EMT).

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo