GP2D

GP2d es una línea celular de adenocarcinoma colorrectal humano derivada de un tumor de colon poco diferenciado. Se estableció junto con una línea hermana, GPSd, a partir de la misma muestra de adenocarcinoma. Si bien ambas líneas comparten alteraciones genéticas similares, consistentes con los patrones comunes observados en el cáncer colorrectal —incluida una duplicación invertida que involucra el cromosoma 10q11-q21—, difieren notablemente en sus características fenotípicas y su comportamiento celular. Cabe destacar que no se detectaron translocaciones que involucraran al protooncogén ret —mapeado en esta región cromosómica— mediante el análisis Southern blot, lo que sugiere que la duplicación no alteró este gen directamente.

Las células GP2d exhiben un patrón de crecimiento cohesivo y expansivo desde los bordes de las microcolonias para formar una monocapa epitelial confluente. Esta morfología va acompañada de patrones de expresión distintivos de moléculas de adhesión como la integrina α2, la desmoplaquina y la E-cadherina, todas las cuales desempeñan un papel en el mantenimiento de la integridad epitelial. Desde el punto de vista funcional, las células GP2d responden de manera robusta al factor de crecimiento epidérmico (EGF), al factor de crecimiento transformante alfa (TGFα) y a la insulina, como lo demuestra el aumento de la proliferación celular en respuesta a estos ligandos. Curiosamente, tanto las GP2d como las GPSd expresan cantidades comparables de receptores de EGF, pero difieren en su expresión de ligandos de estos receptores. Las células GP2d presentan abundante ARNm de anfiregulina, mientras que las GPSd expresan predominantemente ARNm de TGFα con poca o ninguna anfiregulina, lo cual se correlaciona con las diferentes respuestas biológicas observadas.

Estas características convierten a GP2d en un modelo valioso para estudiar la regulación de la señalización de los factores de crecimiento y la adhesión celular en el cáncer colorrectal. Su capacidad de respuesta a los estímulos de la vía del EGF y su morfología epitelial distintiva resaltan su utilidad para investigar la diferenciación y proliferación de las células tumorales. Además, el origen compartido con las GPSd permite realizar estudios comparativos de la variación clonal dentro de los tumores, particularmente en el contexto de la dinámica ligando-receptor y las respuestas de la transición epitelial a mesenquimal (EMT).

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.