GP2D
Cell line · Product number 305778
GP2d is a human colorectal adenocarcinoma cell line derived from a poorly differentiated colon tumor. It was established alongside a sister line, GPSd, fr...
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01General information
- Description
GP2d 是一種源自低分化結腸腫瘤的人類結直腸腺癌細胞系。 該細胞系與姊妹細胞系 GPSd 均源自同一份腺癌檢體。雖然這兩條細胞系均具有與結直腸癌常見模式相符的相似基因變異(包括涉及第 10 號染色體 q11-q21 區段的倒位重複),但在表型特徵和細胞行為方面卻有顯著差異。 值得注意的是,透過 Southern 斑點分析,未檢測到涉及 ret 原癌基因(定位於該染色體區域)的易位,這表明該重複並未直接破壞該基因。
GP2d 細胞展現出由微菌落邊緣向外擴散的凝聚性生長模式,最終形成密合的上皮單層。此形態伴隨著黏附分子(如 α2-整合素、結締蛋白及 E-鈣黏蛋白)的獨特表達模式,這些分子皆在維持上皮完整性方面發揮作用。 在功能方面,GP2d 細胞對表皮生長因子(EGF)、轉化生長因子-α(TGFα)及胰島素有強烈的反應,這從細胞在接觸這些配體後增殖增加的現象即可證實。 值得注意的是,GP2d 與 GPSd 細胞雖表達數量相當的 EGF 受體,但在 EGF 受體配體的表達上卻有所不同。GP2d 細胞含有豐富的 Amphiregulin mRNA,而 GPSd 細胞則主要表達 TGFα mRNA,且幾乎不含 Amphiregulin,這與觀察到的不同生物學反應相吻合。
這些特徵使 GP2d 成為研究結直腸癌中生長因子訊號傳導與細胞黏附調控的寶貴模型。其對 EGF 通路刺激的反應性,以及獨特的上皮形態,突顯了其在探究腫瘤細胞分化與增殖方面的實用價值。 此外,由於其與 GPSd 具有共同的起源,因此可藉此進行腫瘤內克隆變異的比較研究,特別是在配體-受體動態以及上皮-間質轉化(EMT)反應的背景下。
- Tissue
- 冒號
- Disease
- 腺癌
- Synonyms
- Gp2d
- Gp2D
- GP2D
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- GP2D(Cytion 型號 305778)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2450
04Expression and susceptibility
- Mutational profile
- 突變:KRAS,單點突變,p.Gly12Asp (c.35G>A),雜合子,TP53
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 71年
- Ethnicity
- 高加索人
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Disclaimer
- 本產品所提供的細胞僅供體外實驗室研究之用,不得用於臨床或診斷用途,亦不得施予人類或用於獸醫用途。使用者必須遵守所有適用於研究環境中處理及使用這些細胞的相關指引與法規。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
