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Gp2d, Gp2D, GP2D

GP2D

Cell line · 제품 번호 305778

GP2d is a human colorectal adenocarcinoma cell line derived from a poorly differentiated colon tumor. It was established alongside a sister line, GPSd, fr...

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사용자 지정 / 추천 사항

재고 있음
롯
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1

01일반 정보

설명

GP2d는 분화도가 낮은 결장 종양에서 유래한 인간 대장 선암 세포주이다. 이 세포주는 동일한 선암 조직 표본에서 유래한 자매 세포주인 GPSd와 함께 확립되었다. 두 세포주 모두 10번 염색체 10q11-q21 부위의 역전 중복을 포함하여 대장암에서 흔히 관찰되는 패턴과 일치하는 유사한 유전적 변이를 공유하지만, 표현형적 특성과 세포 행동 면에서는 현저한 차이를 보인다. 특히, 이 염색체 영역에 매핑된 ret 원종양유전자와 관련된 전좌는 서던 블롯 분석을 통해 검출되지 않았으며, 이는 중복이 이 유전자를 직접적으로 파괴하지 않았음을 시사한다.

GP2d 세포는 미세콜로니의 가장자리에서 응집적이고 확산되는 성장 양상을 보이며, 융합된 상피 단층을 형성한다. 이러한 형태학적 특징은 상피의 완전성 유지에 역할을 하는 α2-인테그린, 데스모플라킨, E-카데린과 같은 접착 분자들의 뚜렷한 발현 양상과 동반된다. 기능적으로, GP2d 세포는 표피 성장 인자(EGF), 변형 성장 인자-알파(TGFα), 인슐린에 강력하게 반응하며, 이는 이러한 리간드에 대한 반응으로 세포 증식이 증가하는 것으로 입증된다. 흥미롭게도 GP2d와 GPSd 모두 비슷한 수의 EGF 수용체를 발현하지만, EGF 수용체 리간드의 발현에는 차이가 있다. GP2d 세포는 풍부한 암피레굴린 mRNA를 가지고 있는 반면, GPSd는 암피레굴린이 거의 없거나 전혀 없이 주로 TGFα mRNA를 발현하며, 이는 관찰된 서로 다른 생물학적 반응과 일치한다.

이러한 특징들 덕분에 GP2d는 대장암에서 성장 인자 신호전달 및 세포 접착의 조절을 연구하는 데 유용한 모델이 됩니다. EGF 경로 자극에 대한 반응성과 독특한 상피 형태는 종양 세포의 분화 및 증식을 조사하는 데 있어 이 모델의 유용성을 강조합니다. 또한, GPSd와 기원을 공유한다는 점은 종양 내 클론 변이를 비교 연구할 수 있게 해주며, 특히 리간드-수용체 역학 및 상피-중간엽 전이(EMT) 반응의 맥락에서 유용합니다.

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02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03식별자

인용
GP2D (Cytion 제품 번호 305778)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_2450

04발현 및 감수성

돌연변이 프로파일
돌연변이: KRAS, 단순 돌연변이, p.Gly12Asp (c.35G>A), 이형접합, TP53

05취급 및 배양

배지
DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

07기부자

기증자 연령
71년
민족
백인