GP2D

Η GP2d είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά αδενοκαρκινώματος του παχέος εντέρου που προέρχεται από έναν κακώς διαφοροποιημένο όγκο του παχέος εντέρου. Δημιουργήθηκε παράλληλα με μια αδελφή σειρά, την GPSd, από το ίδιο δείγμα αδενοκαρκινώματος. Ενώ και οι δύο σειρές παρουσιάζουν παρόμοιες γενετικές μεταλλάξεις που συνάδουν με τα συνήθη πρότυπα που παρατηρούνται στον καρκίνο του παχέος εντέρου, συμπεριλαμβανομένης μιας ανεστραμμένης διπλασιασμού που αφορά το χρωμόσωμα 10q11-q21, διαφέρουν σημαντικά ως προς τα φαινοτυπικά χαρακτηριστικά και την κυτταρική συμπεριφορά τους. Αξίζει να σημειωθεί ότι δεν ανιχνεύθηκαν μετατοπίσεις που να εμπλέκουν το πρωτοογκογονίδιο ret —το οποίο χαρτογραφείται σε αυτή τη χρωμοσωμική περιοχή— μέσω ανάλυσης Southern blot, γεγονός που υποδηλώνει ότι η διπλασιασμός δεν διατάραξε άμεσα αυτό το γονίδιο.

Τα κύτταρα GP2d εμφανίζουν ένα συνεκτικό, εκτεταμένο πρότυπο ανάπτυξης από τις άκρες των μικροαποικιών για να σχηματίσουν ένα συρρέον επιθηλιακό μονοστρωματικό στρώμα. Αυτή η μορφολογία συνοδεύεται από διακριτά πρότυπα έκφρασης μορίων προσκόλλησης όπως η α2-ιντεγκρίνη, η δεσμοπλακίνη και η Ε-καδερίνη, τα οποία παίζουν ρόλο στη διατήρηση της επιθηλιακής ακεραιότητας. Λειτουργικά, τα κύτταρα GP2d ανταποκρίνονται έντονα στον επιδερμικό αυξητικό παράγοντα (EGF), στον μετασχηματιστικό αυξητικό παράγοντα-άλφα (TGFα) και στην ινσουλίνη, όπως αποδεικνύεται από τον αυξημένο πολλαπλασιασμό των κυττάρων σε απόκριση σε αυτούς τους συνδέτες. Είναι ενδιαφέρον ότι τόσο τα GP2d όσο και τα GPSd εκφράζουν συγκρίσιμους αριθμούς υποδοχέων EGF, αλλά διαφέρουν ως προς την έκφραση των προσδετών των υποδοχέων EGF. Τα κύτταρα GP2d διαθέτουν άφθονο mRNA αμφιρεγουλίνης, ενώ τα GPSd εκφράζουν κυρίως mRNA TGFα με ελάχιστη έως καθόλου αμφιρεγουλίνη, κάτι που συσχετίζεται με τις διαφορετικές βιολογικές αποκρίσεις που παρατηρούνται.

Αυτά τα χαρακτηριστικά καθιστούν το GP2d ένα πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη της ρύθμισης της σηματοδότησης των αυξητικών παραγόντων και της κυτταρικής προσκόλλησης στον καρκίνο του παχέος εντέρου. Η ανταπόκρισή του στα ερεθίσματα της οδού EGF και η διακριτή επιθηλιακή μορφολογία του υπογραμμίζουν τη χρησιμότητά του στη διερεύνηση της διαφοροποίησης και του πολλαπλασιασμού των καρκινικών κυττάρων. Επιπλέον, η κοινή προέλευση με το GPSd επιτρέπει συγκριτικές μελέτες της κλωνικής παραλλαγής εντός των όγκων, ιδιαίτερα στο πλαίσιο της δυναμικής των προσδετών-υποδοχέων και των αποκρίσεων της επιθηλιακής προς μεσεγχυματικής μετάβασης (EMT).

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης