GP2D

GP2d is een menselijke celijn van colorectaal adenocarcinoom, afkomstig van een slecht gedifferentieerde dikke-darmtumor. Deze celijn werd samen met een zusterlijn, GPSd, opgericht uit hetzelfde adenocarcinoom-monster. Hoewel beide lijnen vergelijkbare genetische veranderingen vertonen die overeenkomen met veelvoorkomende patronen bij colorectale kanker, waaronder een omgekeerde duplicatie op chromosoom 10q11-q21, verschillen ze aanzienlijk in hun fenotypische kenmerken en cellulair gedrag. Opvallend is dat er bij Southern-blotanalyse geen translocaties werden gedetecteerd waarbij het ret-proto-oncogen – dat in dit chromosomale gebied is gekartoteerd – betrokken was, wat suggereert dat de duplicatie dit gen niet direct heeft verstoord.

GP2d-cellen vertonen een samenhangend, zich uitbreidend groeipatroon vanaf de randen van microkolonies, waardoor een confluente epitheliale monolaag wordt gevormd. Deze morfologie gaat gepaard met duidelijke expressiepatronen van adhesiemoleculen zoals α2-integrine, desmoplakine en E-cadherine, die allemaal een rol spelen bij het behoud van de epitheliale integriteit. Functioneel reageren GP2d-cellen krachtig op epidermale groeifactor (EGF), transformerende groeifactor-alfa (TGFα) en insuline, zoals blijkt uit de verhoogde celproliferatie als reactie op deze liganden. Interessant is dat zowel GP2d- als GPSd-cellen een vergelijkbaar aantal EGF-receptoren tot expressie brengen, maar verschillen in hun expressie van EGF-receptorliganden. GP2d-cellen hebben overvloedig amphireguline-mRNA, terwijl GPSd-cellen voornamelijk TGFα-mRNA tot expressie brengen met weinig tot geen amphireguline, wat correleert met de waargenomen verschillende biologische reacties.

Deze kenmerken maken GP2d tot een waardevol model voor het bestuderen van de regulatie van groeifactorsignalering en celadhesie bij colorectale kanker. De responsiviteit op stimuli van de EGF-route en de kenmerkende epitheliale morfologie onderstrepen het nut ervan bij het onderzoeken van tumorceldifferentiatie en -proliferatie. Bovendien maakt de gedeelde oorsprong met GPSd vergelijkende studies mogelijk van klonale variatie binnen tumoren, met name in de context van ligand-receptordynamica en reacties op de epitheliale-naar-mesenchymale overgang (EMT).

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring