B-LCL-HROC69

B-LCL-HROC69 הוא קו תאים לימפוציטואידיים מסוג B שהונצחו על ידי נגיף אפשטיין-בר (EBV) והוקמו מתאי B החודרים לגידול (TiBc) שבודדו מדגימת קרצינומה קולורקטלית ראשונית המכונה HROC69. הגידול המקורי מקורו בחולה בוגר עם קרצינומה קולורקטלית בצד ימין מסוג ספורדי קונבנציונלי ובשלב מתקדם. תאי B בודדו מרקמת הגידול שנותחה זה עתה והונצחו ex vivo באמצעות supernatant מתאי B95/8 של קוף מרמוסט המייצרים EBV בנוכחות ציקלוספורין A כדי לדכא את צמיחת תאי T ו-NK. צמיחתם של שיבוטים של תאי B שעברו שינוי EBV התרחשה בדרך כלל תוך מספר שבועות, והשיבוט אושר באמצעות ניתוח של שינוי גנים של שרשרת כבדה וקלה של אימונוגלובולינים באמצעות פרוטוקולי PCR מרובי BIOMED-2.

B-LCL-HROC69 מפריש אימונוגלובולין A (IgA), כפי שנקבע על ידי ELISA ספציפי לאיזוטופ של supernatant מתרבית ארוכת טווח. בניגוד למספר קווי TiBc המייצרים IgG שהוקמו במקביל, IgA שמקורו ב-HROC69 לא אופיין עוד יותר עבור קישור תאי גידול בבדיקות הסינון התפקודיות הראשוניות. חשוב לציין כי לא התרחשה צמיחה ספונטנית של תרבויות תאי B בהיעדר EBV אקסוגני, מה שמצביע על כך שההנצחה היא אירוע במבחנה ולא תוצאה של זיהום EBV סמוי in vivo. לפיכך, B-LCL-HROC69 מייצג מודל של תאי B חד-שבטיים, בעלי ניסיון אנטיגני, החודרים לגידול, המתאים לחקר תגובות חיסוניות הומורליות בסביבה המיקרו-סביבתית של קרצינומה קולורקטלית ולזיהוי פוטנציאלי של אנטיגנים הקשורים לגידול המזוהים על ידי שיבוטים של תאי B המתרבים באופן מקומי.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו