B-LCL-HROC69

B-LCL-HROC69 — це імунізована вірусом Епштейна-Барра (EBV) лінія В-лімфобластоїдних клітин, створена з В-клітин, що інфільтрують пухлину (TiBc), виділених з первинного зразка колоректального раку, позначеного як HROC69. Батьківська пухлина походила від дорослого пацієнта чоловічої статі з правобічним колоректальним раком звичайного спорадичного типу та захворюванням на пізній стадії. В-клітини були виділені зі свіжовидаленої пухлинної тканини та імунізовані ex vivo за допомогою супернатанта з клітинної лінії B95/8 мармозет, що продукує EBV, у присутності циклоспорину А для пригнічення росту Т- та NK-клітин. Зростання клонів В-клітин, трансформованих EBV, зазвичай відбувалося протягом декількох тижнів, а клональність підтверджувалася аналізом перегрупування генів важких і легких ланцюгів імуноглобуліну за допомогою протоколів мультиплексного ПЛР BIOMED-2.

B-LCL-HROC69 секретує імуноглобулін A (IgA), що було визначено за допомогою ізотип-специфічного ELISA довготривалих культуральних супернатантів. На відміну від декількох ліній TiBc, що продукують IgG, створених паралельно, IgA, отриманий з HROC69, не був додатково охарактеризований щодо зв'язування з пухлинними клітинами в початкових функціональних скринінгових аналізах. Важливо, що в відсутність екзогенного EBV не відбувалося спонтанного розростання культур В-клітин, що вказує на те, що імунізація є ін вітро явищем, а не наслідком латентної інфекції EBV ін віво. Отже, B-LCL-HROC69 представляє собою моноклональну модель В-клітин, що інфільтрують пухлину, які мають досвід взаємодії з антигеном, придатну для дослідження гуморальних імунних реакцій у мікросередовищі колоректального раку та для потенційної ідентифікації пухлинних антигенів, що розпізнаються локально розширеними клонами В-клітин.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>