B-LCL-HROC69

B-LCL-HROC69 yra Epstein-Barr viruso (EBV) nemirtinga B limfoblastoidų ląstelių linija, sukurta iš naviko infiltruojančių B ląstelių (TiBc), izoliuotų iš pirminio kolorektalinio karcinomos mėginio, pavadinto HROC69. Pirminis navikas buvo kilęs iš suaugusio vyro, sergančio dešiniojo pusės kolorektaliniu karcinomu, kuris buvo įprasto sporadinio tipo ir pažengusios stadijos. B ląstelės buvo izoliuotos iš šviežiai pašalinto naviko audinio ir nemirtingos ex vivo naudojant EBV gaminančios B95/8 marmoset ląstelių linijos supernatanto buvimą ciklosporino A akivaizdoje, siekiant slopinti T ir NK ląstelių augimą. EBV transformuotų B ląstelių klonų augimas paprastai vyko per kelias savaites, o klonalumas buvo patvirtintas imunoglobulino sunkiųjų ir lengvųjų grandžių genų pertvarkymo analize, naudojant BIOMED-2 daugialypės PCR protokolus.

B-LCL-HROC69 išskiria imunoglobuliną A (IgA), kaip nustatyta izotipui būdingais ELISA ilgalaikės kultūros supernatantuose. Priešingai nei kelios lygiagrečiai sukurtos IgG gaminančios TiBc linijos, IgA, gautas iš HROC69, nebuvo toliau charakterizuojamas dėl naviko ląstelių jungimosi pradiniuose funkciniuose atrankos tyrimuose. Svarbu pažymėti, kad be egzogeninio EBV nebuvo spontaniško B ląstelių kultūrų augimo, o tai rodo, kad nemirtingumas yra in vitro reiškinys, o ne latentinės EBV infekcijos in vivo pasekmė. Todėl B-LCL-HROC69 yra monokloninis, antigeną patyręs naviką infiltruojantis B ląstelių modelis, tinkamas tirti humoralinius imuninius atsakus kolorektalinės karcinomos mikroaplinkoje ir potencialiai identifikuoti naviką asocijuotus antigenus, kuriuos atpažįsta lokaliai išsiplėtę B ląstelių klonai.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime