B-LCL-HROC69

B-LCL-HROC69 adalah garis sel limfoblastoid B yang diimortalkan oleh virus Epstein-Barr (EBV), yang didirikan dari sel B yang menembus tumor (TiBc) yang diisolasi dari spesimen karsinoma kolorektal primer yang diberi label HROC69. Tumor induk berasal dari pasien laki-laki dewasa dengan karsinoma kolorektal sisi kanan tipe sporadis konvensional dan penyakit stadium lanjut. Sel B diisolasi dari jaringan tumor yang baru diangkat dan diimortalkan ex vivo menggunakan supernatant dari garis sel marmoset B95/8 yang memproduksi EBV, dengan penambahan cyclosporin A untuk menekan pertumbuhan sel T dan NK. Pertumbuhan klon sel B yang diubah oleh EBV biasanya terjadi dalam beberapa minggu, dan klonalitas dikonfirmasi melalui analisis pengaturan gen rantai berat dan ringan imunoglobulin menggunakan protokol PCR multiplex BIOMED-2.

B-LCL-HROC69 menghasilkan imunoglobulin A (IgA), seperti yang ditentukan oleh ELISA spesifik isotype pada supernatant kultur jangka panjang. Berbeda dengan beberapa garis sel TiBc yang menghasilkan IgG yang dikembangkan secara paralel, IgA yang dihasilkan oleh HROC69 tidak dianalisis lebih lanjut untuk ikatan sel tumor dalam uji fungsi awal. Pentingnya, tidak terjadi pertumbuhan spontan kultur sel B dalam absence EBV eksogen, menunjukkan bahwa imortalitas adalah peristiwa in vitro rather than konsekuensi infeksi EBV laten in vivo. B-LCL-HROC69 oleh karena itu mewakili model sel B infiltran tumor monoklonal yang telah terpapar antigen, cocok untuk menyelidiki respons imun humoral dalam mikro lingkungan karsinoma kolorektal dan untuk identifikasi potensial antigen terkait tumor yang dikenali oleh klon sel B yang diperluas secara lokal.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami