B-LCL-HROC69

B-LCL-HROC69 er en Epstein-Barr-virus (EBV)-immortaliseret B-lymfoblastoidcellelinje etableret fra tumorinfiltrerende B-celler (TiBc) isoleret fra en primær kolorektal karcinomprøve betegnet HROC69. Den oprindelige tumor stammede fra en voksen mandlig patient med højresidet kolorektal karcinom af konventionel sporadisk type og fremskreden sygdom. B-celler blev isoleret fra frisk resekteret tumorvæv og immortaliseret ex vivo ved hjælp af supernatant fra den EBV-producerende B95/8-marmosetcellelinje i nærværelse af cyclosporin A for at undertrykke T- og NK-celleudvækst. Udviklingen af EBV-transformerede B-cellekloner fandt typisk sted inden for flere uger, og klonaliteten blev bekræftet ved analyse af immunoglobulin-tunge- og lette-kæde-genomlejring ved hjælp af BIOMED-2 multiplex PCR-protokoller.

B-LCL-HROC69 udskiller immunoglobulin A (IgA), som bestemt ved isotype-specifik ELISA af langvarige kultursupernatanter. I modsætning til flere IgG-producerende TiBc-linjer, der blev etableret parallelt, blev IgA afledt af HROC69 ikke yderligere karakteriseret for tumorcellebinding i de indledende funktionelle screeningsassays. Det er vigtigt at bemærke, at der ikke forekom spontan udvækst af B-cellekulturer i fravær af eksogent EBV, hvilket indikerer, at immortaliseringen er en in vitro-begivenhed snarere end en konsekvens af latent EBV-infektion in vivo. B-LCL-HROC69 repræsenterer derfor en monoklonal, antigenerfaren tumorinfiltrerende B-cellemodel, der er egnet til undersøgelse af humorale immunresponser i mikro miljøet i kolorektal karcinom og til potentiel identifikation af tumorassocierede antigener, der genkendes af lokalt ekspanderede B-cellekloner.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring