B-LCL-HROC69

B-LCL-HROC69 是一種由愛潑斯坦-巴爾病毒（EBV）使之永生化的 B 淋巴母細胞樣細胞系，其源自一例編號為 HROC69 的原發性結直腸癌標本中分離出的腫瘤浸潤性 B 細胞（TiBc）。 該原發性腫瘤源自一名成年男性患者，其患有常規散發型右側結直腸癌，且處於晚期。 B 細胞從剛切除的腫瘤組織中分離出來，並在環孢素 A 的存在下，利用產生 EBV 的 B95/8 狨猴細胞系的上清液進行體外不朽化，以抑制 T 細胞和 NK 細胞的增殖。 EBV 轉化之 B 細胞克隆的增殖通常在數週內發生，並透過採用 BIOMED-2 多重 PCR 協議進行免疫球蛋白重鏈與輕鏈基因重排分析，以確認其克隆性。

根據長期培養上清液的同型特異性 ELISA 檢測結果，B-LCL-HROC69 會分泌免疫球蛋白 A（IgA）。 與同期建立的數個產生 IgG 的 TiBc 細胞系不同，在初步的功能篩選試驗中，並未進一步鑑定 HROC69 所衍生的 IgA 與腫瘤細胞的結合特性。 重要的是，在缺乏外源性EBV的情況下，B細胞培養物並未發生自發性增殖，這表明其不朽化是體外事件，而非體內潛伏性EBV感染的結果。 因此，B-LCL-HROC69 代表一種單克隆、曾接觸抗原的腫瘤滲透 B 細胞模型，適用於研究結直腸癌微環境中的體液免疫反應，並可藉此潛在識別由局部擴增的 B 細胞克隆所識別的腫瘤相關抗原。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。