B-LCL-HROC69

B-LCL-HROC69 เป็นเซลล์ไลน์ลิมโฟบลาสต์ B ที่ถูกทำให้เป็นอมตะด้วยไวรัสเอปสไตน์-บาร์ (EBV) ซึ่งสร้างขึ้นจากเซลล์ B ที่แทรกซึมในเนื้องอก (TiBc) ที่แยกได้จากชิ้นเนื้องอกมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดปฐมภูมิที่ระบุชื่อว่า HROC69 เซลล์ต้นกำเนิดของเนื้องอกมาจากผู้ป่วยชายวัยผู้ใหญ่ที่มีมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักด้านขวาชนิดเกิดแบบกระจัดกระจายทั่วไปและอยู่ในระยะลุกลาม เซลล์บีถูกแยกออกจากเนื้อเยื่อเนื้องอกที่เพิ่งถูกตัดออก และทำให้เป็นอมตะในสภาพ ex vivo โดยใช้ของเหลวใสจากเซลล์ไลน์ B95/8 ของลิงมาร์โมเซตที่ผลิตเชื้อ EBV ร่วมกับไซโคลสปอรินเอเพื่อยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ทีและเซลล์เอ็นเค การเจริญเติบโตของโคลนเซลล์บีที่ถูกเปลี่ยนแปลงโดย EBV มักเกิดขึ้นภายในไม่กี่สัปดาห์ และการเป็นโคลนถูกยืนยันโดยการวิเคราะห์การจัดเรียงใหม่ของยีนโซ่หนักและโซ่เบาของอิมมูโนโกลบูลินโดยใช้โปรโตคอล BIOMED-2 multiplex PCR

B-LCL-HROC69 ปล่อยอิมมูโนโกลบูลิน A (IgA) ซึ่งได้รับการยืนยันโดยการทดสอบ ELISA ที่จำเพาะต่อไอโซไทป์ของน้ำใสจากการเพาะเลี้ยงระยะยาว ในทางตรงกันข้ามกับสายพันธุ์ TiBc ที่ผลิต IgG หลายสายพันธุ์ที่สร้างขึ้นพร้อมกัน IgA ที่ได้จาก HROC69 ไม่ได้รับการวิเคราะห์เพิ่มเติมสำหรับการจับกับเซลล์มะเร็งในขั้นตอนการคัดกรองการทำงานเบื้องต้น ที่สำคัญ ไม่มีการเจริญเติบโตโดยธรรมชาติของเซลล์ B-cell ในวัฒนธรรมที่ปราศจาก EBV ภายนอก ซึ่งบ่งชี้ว่าการไม่ตายตามธรรมชาติเป็นเหตุการณ์ที่เกิดขึ้นในหลอดทดลองมากกว่าผลจากการติดเชื้อ EBV ที่แฝงตัวในร่างกาย B-LCL-HROC69 จึงเป็นตัวแทนของโมโนโคลนอลเซลล์ B ที่แทรกซึมในเนื้องอกซึ่งมีประสบการณ์กับแอนติเจน เหมาะสำหรับการศึกษาการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันแบบฮิวมอรัลภายในสภาพแวดล้อมจุลภาคของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก และสำหรับการระบุแอนติเจนที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอกซึ่งถูกจดจำโดยโคลนเซลล์ B ที่ขยายตัวในท้องถิ่น

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.