.jpg)
- الأنسجة
- الخصية
- المرض
- خلايا ليديغ السليلة الطبيعية (غير مسببة للأورام؛ فأر BALB/c)
- موقع الانتشار
- لا ينطبق (سلالة خلايا خصوية طبيعية غير مسببة للأورام)
- المرادفات
- TM-3
المستندات
TM3
Cell line · رقم المنتج 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
التخصيص / التوصيات
- TM3Cell line€430.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
- خلايا TM3 هي خط خلوي فريد من نوعه مشتق من خلايا Leydig من ذكور الفئران التي يتراوح عمرها بين 11 و13 يوماً من العمر، وتُظهر خصائص نمو ملتصقة. هذه الخلايا غير مسببة للأورام، حيث أنها لا تسبب أوراماً في الفئران المثبطة للمناعة، على الرغم من أنها يمكن أن تشكل مستعمرات في وسط شبه صلب. وتعبر عن جين البروستاغلاندين F2a وتتميز بالعديد من علامات التعبير بما في ذلك الهرمون الملوتن (LH) وعامل نمو البشرة (EGF) وعلامات إيجابية لمستقبلات الأندروجين والإستروجين والبروجسترون. ومن السمات البارزة لخلايا TM3 هي استجابتها للهرمون المُنشِّط للجريب (LH)، مما يؤدي إلى زيادة إنتاج cAMP؛ ومع ذلك، فهي لا تستجيب للهرمون المنبه للجريب (FSH). ويعتمد الحفاظ على استجابة الهرمون LH على كمية المصل. بالإضافة إلى ذلك، في وجود هرمون LH، يمكن لهذه الخلايا استقلاب الكوليسترول. وقد تم اختبارها ووجد أنها سلبية لفيروس إكتروميليا (جدري الفأر)، مما يضمن مستوى عالٍ من السلامة للاستخدام المختبري
- الأنسجة
- الخصية
- المرض
- خلايا ليديغ السليلة الطبيعية (غير مسببة للأورام؛ فأر BALB/c)
- موقع الانتشار
- لا ينطبق (سلالة خلايا خصوية طبيعية غير مسببة للأورام)
- التطبيقات
- بيولوجيا خلايا ليديغ؛ تكوين الستيرويدات في الخصيتين؛ إشارات LH/cAMP؛ دراسات مستقبلات الأندروجين/الإستروجين/البروجسترون؛ استجابة الغدد التناسلية؛ استقلاب الكوليسترول؛ أبحاث نمو الخصيتين ووظائفهما
- المرادفات
- TM-3
02التصنيف
- كائن حي
- الماوس
- الجنس
- ذكر
- خصائص النمو
- الملتزم
- حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- خالية من الكائنات المعدلة وراثيًا
- تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- الظهارة
- نوع الخلية
- خلايا الليديغ
- زمن المضاعفة
- حوالي 36 إلى 48 ساعة
04المعرّفات
- المرجع
- TM3 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 305167)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 10090
- سيلوصور
- CVCL_4326
05التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- أضف إلى الوسط 2.5% من FBS، و5% من مصل الحصان
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- نسبة التقسيم
- من 1 إلى 3
- كثافة البذر
- من 1 إلى 3 × 10⁴ خلية/سم²
- تجديد السوائل
- 2 إلى 3 مرات في الأسبوع
- التعافي بعد ذوبان الجليد
- بعد إذابة الثلج، قم بزرع الخلايا بكثافة 5 × 10⁴ خلية/سم² واتركها لمدة لا تقل عن 24–48 ساعة حتى تلتصق قبل إجراء أول تغيير للوسط. حافظ على استجابة LH التي تعتمد على دفعة المصل من خلال التحقق من استجابة cAMP لـ LH لكل دفعة من مصل الدم البشري (FBS).
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
07المانح
- السلالة / النوع الفرعي
- بالب/ج
- عمر المتبرع
- من 11 إلى 13 يوماً
08الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم
