.jpg)
- Tisu
- Testis
- Penyakit
- Sel Leydig testis normal (tidak bersifat tumorigenik; tikus BALB/c)
- Lokasi metastasis
- Tidak berlaku (garis sel testis normal yang tidak bersifat tumorigenik)
- Sinonim
- TM-3
Dokumen
TM3
Cell line · Nomor produk 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Penyesuaian / Rekomendasi
- TM3Cell line€430.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
- Sel TM3 adalah garis sel unik yang berasal dari sel Leydig tikus jantan berusia 11 hingga 13 hari, yang menunjukkan sifat pertumbuhan yang melekat. Sel-sel ini bersifat non-tumorigenik, karena tidak menyebabkan tumor pada tikus yang mengalami imunosupresi, meskipun mereka dapat membentuk koloni dalam medium semi-padat. Mereka mengekspresikan gen untuk prostaglandin F2a dan ditandai dengan beberapa penanda ekspresi termasuk Luteinizing hormone (LH), Epidermal Growth Factor (EGF), dan penanda positif untuk reseptor androgen, estrogen, dan progesteron. Fitur penting dari sel TM3 adalah responsnya terhadap LH, yang mengarah pada peningkatan produksi cAMP; namun, mereka tidak merespons hormon perangsang folikel (FSH). Pemeliharaan responsifitas LH bergantung pada banyak serum. Selain itu, dengan adanya LH, sel-sel ini dapat memetabolisme kolesterol. Sel-sel ini telah diuji dan dinyatakan negatif terhadap virus ectromelia (cacar tikus), sehingga menjamin standar keamanan yang tinggi untuk penggunaan di laboratorium
- Tisu
- Testis
- Penyakit
- Sel Leydig testis normal (tidak bersifat tumorigenik; tikus BALB/c)
- Lokasi metastasis
- Tidak berlaku (garis sel testis normal yang tidak bersifat tumorigenik)
- Aplikasi
- Biologi sel Leydig; steroidogenesis testis; sinyal LH/cAMP; penelitian reseptor androgen/estrogen/progesteron; respons terhadap gonadotropin; metabolisme kolesterol; penelitian perkembangan dan fungsi testis
- Sinonim
- TM-3
02Klasifikasi
- Organisme
- Tikus
- Seks
- Laki-laki
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Status GMO
- Bebas Transgenik
- Rincian status GMO
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Epitel
- Jenis sel
- Sel Leydig
- Waktu penggandaan
- sekitar 36 hingga 48 jam
04Pengidentifikasi
- Referensi
- TM3 (Nomor katalog Cytion 305167)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Lengkapi media dengan 2,5% FBS, 5% serum kuda
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
- Rasio pemisahan
- 1 sampai 3
- Kepadatan penanaman
- 1 hingga 3 × 10⁴ sel/cm²
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pemulihan pasca-pencairan
- Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 × 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel menempel setidaknya selama 24–48 jam sebelum penggantian medium pertama. Pertahankan responsivitas LH yang bergantung pada lot serum dengan memvalidasi setiap lot FBS terkait respons cAMP terhadap LH.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
07Donatur
- Jenis / subspesies
- BALB/c
- Usia donor
- 11 hingga 13 hari
08Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya
