.jpg)
- Tkivo
- Testis
- Bolezen
- Normalne Leydigove celice v testisih (netumorogene; miš BALB/c)
- Mesto metastaze
- Ni relevantno (normalna, netumorogena testikularna celična linija)
- Sinonimi
- TM-3
Dokumenti
TM3
Cell line · Številka izdelka 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Prilagajanje / Priporočila
- TM3Cell line€430.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
- Celice TM3 so edinstvena celična linija, pridobljena iz 11 do 13 dni starih moških Leydigovih celic miši, ki imajo adherentne rastne lastnosti. Te celice niso tumorogene, saj pri imunosuprimiranih miših ne povzročajo tumorjev, čeprav lahko tvorijo kolonije v poltrdnem gojišču. Izražajo gen za prostaglandin F2a, zanje pa je značilnih več označevalcev izražanja, vključno z luteinizirajočim hormonom (LH), epidermalnim rastnim faktorjem (EGF) in pozitivnimi označevalci za androgene, estrogene in progesteronske receptorje. Pomembna značilnost celic TM3 je njihov odziv na LH, ki povzroči povečanje proizvodnje cAMP; ne odzivajo pa se na folikle stimulirajoči hormon (FSH). Ohranjanje odzivnosti na LH je odvisno od količine seruma. Poleg tega lahko te celice v prisotnosti LH presnavljajo holesterol. Bile so testirane in ugotovljeno je bilo, da so negativne na virus ektromelije (mišje ošpice), kar zagotavlja visok standard varnosti za laboratorijsko uporabo
- Tkivo
- Testis
- Bolezen
- Normalne Leydigove celice v testisih (netumorogene; miš BALB/c)
- Mesto metastaze
- Ni relevantno (normalna, netumorogena testikularna celična linija)
- Uporaba
- Biologija Leydigovih celic; steroidogeneza v testisih; signalizacija LH/cAMP; raziskave receptorjev za androgene, estrogen in progesteron; odzivnost na gonadotropine; presnova holesterola; raziskave razvoja in delovanja testisov
- Sinonimi
- TM-3
02Razvrstitev
- Organizem
- Miška
- Seks
- Moški
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Status GSO
- Brez gensko spremenjenih organizmov
- Podrobnosti o statusu GSO
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijski
- Vrsta celice
- Leydigove celice
- Čas podvojitve
- približno 36 do 48 ur
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- TM3 (kataloška številka Cytion 305167)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 2,5 % FBS, 5 % konjskega seruma
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Razmerje delitve
- 1 do 3
- Gostota setve
- 1 do 3 × 10⁴ celic/cm²
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Obnova po odtaljevanju
- Po odmrznitvi celice posadite v gostoti 5 × 10⁴ celic/cm² in jim pred prvo zamenjavo gojišča pustite vsaj 24–48 ur časa za prirast. Odzivnost na LH, ki je odvisna od serijske številke seruma, ohranite tako, da za vsako serijsko številko FBS preverite odziv cAMP na LH.
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
07Donator
- Pasma / podvrsta
- BALB/c
- Starost darovalca
- 11 do 13 dni
08Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da
