.jpg)
- Szövet
- Herék
- Betegség
- Normális hereszöveti Leydig-sejtek (nem daganatképző; BALB/c egér)
- Áttétes hely
- Nem alkalmazható (normál, nem tumorogén heresejt-vonal)
- Szinonimák
- TM-3
Dokumentumok
TM3
Cell line · Termékszám 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Személyre szabás / Ajánlások
- TM3Cell line€430.00
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
01Általános információk
- Leírás
- A TM3 sejtek 11-13 napos hím egér Leydig-sejtekből származó egyedi sejtvonal, amely tapadó növekedési tulajdonságokkal rendelkezik. Ezek a sejtek nem tumorogének, mivel immunszupprimált egerekben nem okoznak tumort, bár félszilárd táptalajon kolóniákat képezhetnek. A prosztaglandin F2a gént expresszálják, és számos expressziós markerrel jellemezhetők, beleértve a luteinizáló hormont (LH), az epidermális növekedési faktort (EGF), valamint az androgén-, ösztrogén- és progeszteronreceptorok pozitív markereit. A TM3 sejtek figyelemre méltó jellemzője az LH-ra adott válaszuk, amely a cAMP-termelés növekedéséhez vezet; a tüszőstimuláló hormonra (FSH) azonban nem reagálnak. Az LH-rezisztencia fenntartása szérumtétel-függő. Ezenkívül LH jelenlétében ezek a sejtek képesek koleszterint metabolizálni. Vizsgálták és negatívnak találták őket az ectromelia vírusra (egérhimlő), ami magas szintű biztonságot biztosít a laboratóriumi felhasználás számára
- Szövet
- Herék
- Betegség
- Normális hereszöveti Leydig-sejtek (nem daganatképző; BALB/c egér)
- Áttétes hely
- Nem alkalmazható (normál, nem tumorogén heresejt-vonal)
- Alkalmazások
- A Leydig-sejtek biológiája; a herékben zajló szteroidogenezis; az LH/cAMP jelátvitel; az androgén-, ösztrogén- és progeszteron-receptorok vizsgálata; a gonadotropinokra való reagálóképesség; a koleszterin-anyagcsere; a herék fejlődésének és működésének kutatása
- Szinonimák
- TM-3
02Osztályozás
- Organizmus
- Egér
- Szex
- Férfi
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- GMO-státusz
- GMO-mentes
- A GMO-státuszra vonatkozó részletek
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Epithelialis
- Sejttípus
- Leydig-sejtek
- Kettőzési idő
- kb. 36–48 óra
04Azonosítók
- Hivatkozás
- TM3 (Cytion katalógusszám: 305167)
- NCBI adóazonosító szám
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt 2,5% FBS-szel, 5% lószérummal egészítsük ki
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Osztási arány
- 1–3
- Ültetési sűrűség
- 1–3 × 10⁴ sejt/cm²
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Az olvadás utáni helyreállás
- Felolvasztás után a sejteket 5 × 10⁴ sejt/cm² sűrűséggel ültessük be, és az első tápközeg-csere előtt legalább 24–48 órát várjunk a tapadásra. A szérum tételétől függő LH-reakcióképességet úgy tartsuk fenn, hogy minden FBS-tétel esetében ellenőrizzük az LH-ra adott cAMP-választ.
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
07Adományozó
- Faj / alfaj
- BALB/c
- Az adományozó életkora
- 11-13 nap
08Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen
