.jpg)
- Vev
- Testis
- Sykdom
- Normale Leydig-celler i testiklene (ikke-tumorogene; BALB/c-mus)
- Metastaseområde
- Ikke relevant (normal, ikke-tumorogen testikkelcellelinje)
- Synonymer
- TM-3
Dokumenter
TM3
Cell line · Produktnummer 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Tilpasning / Anbefalinger
- TM3Cell line€430.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
- TM3-celler er en unik cellelinje avledet fra 11 til 13 dager gamle mannlige Leydig-celler fra mus, og de har adherente vekstegenskaper. Disse cellene er ikke-tumorogene, ettersom de ikke forårsaker svulster i immunsupprimerte mus, selv om de kan danne kolonier i halvfast medium. De uttrykker genet for prostaglandin F2a og er karakterisert av flere ekspresjonsmarkører, inkludert luteiniserende hormon (LH), epidermal vekstfaktor (EGF) og positive markører for androgen-, østrogen- og progesteronreseptorer. Et bemerkelsesverdig trekk ved TM3-cellene er at de reagerer på LH, noe som fører til en økning i cAMP-produksjonen, men de reagerer ikke på follikkelstimulerende hormon (FSH). Opprettholdelsen av LH-responsen er avhengig av serummengde. I tillegg kan disse cellene metabolisere kolesterol i nærvær av LH. De er testet og funnet negative for ektromelia-virus (musepoks), noe som sikrer en høy sikkerhetsstandard for laboratoriebruk
- Vev
- Testis
- Sykdom
- Normale Leydig-celler i testiklene (ikke-tumorogene; BALB/c-mus)
- Metastaseområde
- Ikke relevant (normal, ikke-tumorogen testikkelcellelinje)
- Søknader
- Leydig-cellebiologi; steroidogenese i testiklene; LH/cAMP-signalering; studier av androgen-, østrogen- og progesteronreseptorer; respons på gonadotropiner; kolesterolmetabolisme; forskning på testikkelutvikling og -funksjon
- Synonymer
- TM-3
02Klassifisering
- Organisme
- Mus
- Sex
- Mann
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- GMO-status
- Uten GMO
- Detaljer om GMO-status
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelial
- Celletype
- Leydig-celler
- Fordoblingstid
- ca. 36 til 48 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- TM3 (Cytion-katalognummer 305167)
- NCBI-skattenummer
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 2,5 % FBS, 5 % hesteserum
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
- Oppdelingsforhold
- 1 til 3
- Såtetthet
- 1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Gjenoppretting etter tining
- Etter tining skal cellene sås med en tetthet på 5 × 10⁴ celler/cm², og det må gis minst 24–48 timer til cellene har festet seg før det første mediumskiftet. Oppretthold den lotavhengige LH-responsen ved å validere hvert FBS-parti med hensyn til cAMP-responsen på LH.
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
07Donor
- Rase / underart
- BALB/c
- Donorens alder
- 11 til 13 dager
08Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtale om materialoverføring kreves
- Ja
