.jpg)
- Тканина
- Яєчко
- Хвороба
- Нормальні клітини Лейдіга яєчка (непухлинні; миша BALB/c)
- Місце метастазування
- Не застосовується (нормальна, непухлинна лінія клітин яєчка)
- Синоніми
- TM-3
Документи
TM3
Cell line · Номер товару 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Налаштування / Рекомендації
- TM3Cell line€430.00
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
01Загальна інформація
- Опис
- Клітини TM3 - це унікальна клітинна лінія, отримана з 11-13-денних клітин Лейдіга мишей-самців, що демонструють властивості адгезивного росту. Ці клітини не є пухлиноутворюючими, оскільки не викликають пухлин у мишей з імуносупресією, хоча вони можуть утворювати колонії в напівтвердому середовищі. Вони експресують ген простагландину F2a і характеризуються кількома маркерами експресії, включаючи лютеїнізуючий гормон (ЛГ), епідермальний фактор росту (ЕФР) і позитивні маркери рецепторів андрогенів, естрогенів і прогестерону. Примітною особливістю клітин TM3 є їхня відповідь на ЛГ, що призводить до збільшення продукції цАМФ, однак вони не реагують на фолікулостимулюючий гормон (ФСГ). Підтримка відповіді на ЛГ залежить від партії сироватки. Крім того, в присутності ЛГ ці клітини можуть метаболізувати холестерин. Вони були протестовані і визнані негативними до вірусу ектромелії (мишачої віспи), що забезпечує високий стандарт безпеки для лабораторного використання
- Тканина
- Яєчко
- Хвороба
- Нормальні клітини Лейдіга яєчка (непухлинні; миша BALB/c)
- Місце метастазування
- Не застосовується (нормальна, непухлинна лінія клітин яєчка)
- Застосування
- Біологія клітин Лейдіга; стероїдогенез у яєчках; сигнальний шлях ЛГ/цАМФ; дослідження рецепторів андрогенів, естрогенів та прогестерону; чутливість до гонадотропінів; метаболізм холестерину; дослідження розвитку та функціонування яєчок
- Синоніми
- TM-3
02Класифікація
- Організм
- Миша
- Секс
- Чоловік
- Характеристики росту
- Прихильник
- Статус ГМО
- Без ГМО
- Детальна інформація щодо статусу ГМО
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Рівень біобезпеки
- 1
03Характеристики
- Морфологія
- Епітеліальний
- Тип клітини
- Клітини Лейдіга
- Час подвоєння
- приблизно від 36 до 48 годин
04Ідентифікатори
- Посилання
- TM3 (номер за каталогом Cytion 305167)
- Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
- 10090
- Целозавр
- CVCL_4326
05Обробка та вирощування
- Живильне середовище
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)
- Атмосфера інкубації
37°C, 5% CO2, волога атмосфера.
- Добавки
- Додайте до середовища 2,5% FBS, 5% кінської сироватки
- Реагент для дисоціації
- Аккутаза
- Пересадка в нове середовище
- Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
- Коефіцієнт розподілу
- від 1 до 3
- Щільність висіву
- від 1 до 3 × 10⁴ клітин/см²
- Оновлення рідини
- 2-3 рази на тиждень
- Відновлення після відлиги
- Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 × 10⁴ клітин/см² і дайте їм прикріпитися протягом щонайменше 24–48 годин перед першою заміною середовища. Забезпечте залежність чутливості до ЛГ від партії сироватки шляхом перевірки кожної партії FBS на реакцію цАМФ на ЛГ.
- Розморожування та культивування
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Контроль якості та кріоконсервація
- Стерильність
Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.
Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.
- Середовище для заморожування
- Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
- Умови зберігання
Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.
- Умови доставки
Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.
07Донор
- Порода / підвид
- BALB/c
- Вік донора
- від 11 до 13 днів
08Правові питання та безпека
- Заходи безпеки
- Плануючи зберігати кріовіал у рідкому азоті для подальшого розморожування, обов'язково слід дотримуватися суворих заходів безпеки. Під час перенесення заморожених зразків до резервуара з рідким азотом або з нього необхідно використовувати захисні рукавички та одяг, а також маску або захисні окуляри. Це необхідно для того, щоб зменшити ризик травмування від потенційних кріогенних вибухів при вилученні, які можуть призвести до розльоту гострих осколків.
- Гарантія
У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту
Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>
- Необхідна угода про передачу матеріалів
- Так
