.jpg)
- Tissue
- Tinh hoàn
- Disease
- Tế bào Leydig bình thường ở tinh hoàn (không gây ung thư; chuột BALB/c)
- Metastatic site
- Không áp dụng (dòng tế bào tinh hoàn bình thường, không gây ung thư)
- Synonyms
- TM-3
Documents
TM3
Cell line · Product number 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Customization / Recommendations
- TM3Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
- Tế bào TM3 là một dòng tế bào độc đáo được phân lập từ tế bào Leydig của chuột đực 11 đến 13 ngày tuổi, có đặc tính phát triển bám dính. Các tế bào này không gây ung thư, vì chúng không gây u ở chuột bị ức chế miễn dịch, mặc dù chúng có thể tạo thành các cụm tế bào trong môi trường bán rắn. Chúng biểu hiện gen cho prostaglandin F2a và được đặc trưng bởi một số dấu hiệu biểu hiện bao gồm hormone luteinizing (LH), yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF) và các dấu hiệu dương tính cho thụ thể androgen, estrogen và progesterone. Một đặc điểm nổi bật của tế bào TM3 là phản ứng của chúng với LH, dẫn đến tăng sản xuất cAMP; tuy nhiên, chúng không phản ứng với hormone kích thích nang trứng (FSH). Sự duy trì phản ứng với LH phụ thuộc vào lô huyết thanh. Ngoài ra, trong sự hiện diện của LH, các tế bào này có thể chuyển hóa cholesterol. Chúng đã được kiểm tra và xác định là âm tính với virus ectromelia (mousepox), đảm bảo tiêu chuẩn an toàn cao cho việc sử dụng trong phòng thí nghiệm
- Tissue
- Tinh hoàn
- Disease
- Tế bào Leydig bình thường ở tinh hoàn (không gây ung thư; chuột BALB/c)
- Metastatic site
- Không áp dụng (dòng tế bào tinh hoàn bình thường, không gây ung thư)
- Applications
- Sinh học tế bào Leydig; quá trình tổng hợp steroid ở tinh hoàn; con đường truyền tín hiệu LH/cAMP; các nghiên cứu về thụ thể androgen/estrogen/progesterone; khả năng đáp ứng với gonadotropin; chuyển hóa cholesterol; nghiên cứu về sự phát triển và chức năng của tinh hoàn
- Synonyms
- TM-3
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Thượng bì
- Cell type
- Tế bào Leydig
- Doubling time
- khoảng 36 đến 48 giờ
04Identifiers
- Citation
- TM3 (Số catalog Cytion 305167)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.
- Supplements
- Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 2,5% huyết thanh bò (FBS) và 5% huyết thanh ngựa
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
- Split ratio
- 1 đến 3
- Seeding density
- 1 đến 3 × 10⁴ tế bào/cm²
- Fluid renewal
- 2 đến 3 lần mỗi tuần
- Post-thaw recovery
- Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 × 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào bám dính ít nhất 24–48 giờ trước khi thay môi trường nuôi cấy lần đầu. Duy trì khả năng đáp ứng với LH tùy thuộc vào lô huyết thanh bằng cách xác nhận phản ứng cAMP đối với LH của từng lô FBS.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.
Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.
- Freeze medium
- Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
- Storage conditions
Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.
- Shipping conditions
Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.
07Donor
- Breed / subspecies
- BALB/c
- Donor age
- 11 đến 13 ngày
08Legal and safety
- Safety precautions
- Khi lập kế hoạch lưu trữ ống cryovial trong nitơ lỏng để rã đông sau này, việc tuân thủ các biện pháp an toàn nghiêm ngặt là bắt buộc. Găng tay và quần áo bảo hộ phù hợp là điều cần thiết, và việc sử dụng khẩu trang hoặc kính bảo hộ là bắt buộc trong quá trình chuyển mẫu đông lạnh vào hoặc ra khỏi bể nitơ lỏng. Điều này nhằm giảm thiểu nguy cơ chấn thương do nổ ống cryovial khi lấy ra, có thể dẫn đến việc văng ra các mảnh vỡ sắc nhọn.
- Warranty
Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.
Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
