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- Tissue
- Testículo
- Disease
- Células de Leydig testiculares normales (no tumorigénicas; ratón BALB/c)
- Metastatic site
- No aplicable (línea celular testicular normal, no tumorigénica)
- Synonyms
- TM-3
Documents
TM3
Cell line · Product number 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
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01General information
- Description
- Las células TM3 son una línea celular única derivada de células de Leydig de ratones machos de entre 11 y 13 días de edad, que presentan propiedades de crecimiento adherente. Estas células no son tumorigénicas, ya que no causan tumores en ratones inmunodeprimidos, aunque pueden formar colonias en medio semisólido. Expresan el gen de la prostaglandina F2a y se caracterizan por varios marcadores de expresión, entre ellos la hormona luteinizante (LH), el factor de crecimiento epidérmico (EGF) y marcadores positivos para los receptores de andrógenos, estrógenos y progesterona. Una característica notable de las células TM3 es su respuesta a la LH, lo que conduce a un aumento en la producción de AMPc; sin embargo, no responden a la hormona folículoestimulante (FSH). El mantenimiento de la respuesta a la LH depende del lote de suero. Además, en presencia de LH, estas células pueden metabolizar el colesterol. Se han sometido a pruebas y han dado negativo para el virus de la ectromelia (viruela del ratón), lo que garantiza un alto nivel de seguridad para su uso en laboratorio.
- Tissue
- Testículo
- Disease
- Células de Leydig testiculares normales (no tumorigénicas; ratón BALB/c)
- Metastatic site
- No aplicable (línea celular testicular normal, no tumorigénica)
- Applications
- Biología de las células de Leydig; esteroidogénesis testicular; señalización de la LH/AMPc; estudios sobre los receptores de andrógenos, estrógenos y progesterona; respuesta a las gonadotropinas; metabolismo del colesterol; investigación sobre el desarrollo y la función testicular
- Synonyms
- TM-3
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Epithelial
- Cell type
- Células de Leydig
- Doubling time
- aprox. de 36 a 48 horas
04Identifiers
- Citation
- TM3 (número de catálogo de Cytion 305167)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p: 0,5 mM de piruvato de sodio, p: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añada al medio un 2,5 % de FBS y un 5 % de suero de caballo
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Split ratio
- 1 a 3
- Seeding density
- De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Post-thaw recovery
- Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se adhieran durante al menos 24–48 horas antes del primer cambio de medio. Mantenga la capacidad de respuesta a la LH, que depende del lote de suero, validando cada lote de FBS en cuanto a su respuesta del AMPc a la LH.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
07Donor
- Breed / subspecies
- BALB/c
- Donor age
- De 11 a 13 días
08Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
