.jpg)
- Тъкан
- Тестис
- Заболяване
- Нормални лейдигови клетки на тестисите (нетуморогенни; мишка от линията BALB/c)
- Място на метастазите
- Неприложимо (нормална, нетуморогенна клетъчна линия от тестисите)
- Синоними
- TM-3
Документи
TM3
Cell line · Номер на продукта 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Персонализиране / Препоръки
- TM3Cell line€430.00
Препоръчани (най-новата партида)
01Обща информация
- Описание
- Клетките TM3 са уникална клетъчна линия, получена от 11-13-дневни мъжки клетки на Лейдиг на мишки, която има адхезивни свойства на растеж. Тези клетки не са туморогенни, тъй като не предизвикват тумори при имуносупресирани мишки, въпреки че могат да образуват колонии в полутвърда среда. Те експресират гена за простагландин F2a и се характеризират с няколко маркера за експресия, включително лутеинизиращ хормон (LH), епидермален растежен фактор (EGF) и положителни маркери за андрогенни, естрогенни и прогестеронови рецептори. Забележителна характеристика на клетките TM3 е техният отговор на LH, който води до увеличаване на производството на cAMP; те обаче не реагират на фоликулостимулиращия хормон (FSH). Поддържането на реактивността на LH зависи от количеството серум. Освен това в присъствието на LH тези клетки могат да метаболизират холестерол. Те са тествани и е установено, че са отрицателни за вируса на ектромелия (миша едра шарка), което гарантира висок стандарт на безопасност за лабораторна употреба
- Тъкан
- Тестис
- Заболяване
- Нормални лейдигови клетки на тестисите (нетуморогенни; мишка от линията BALB/c)
- Място на метастазите
- Неприложимо (нормална, нетуморогенна клетъчна линия от тестисите)
- Приложения
- Биология на лейдиговите клетки; стероидогенеза в тестисите; LH/cAMP сигнализация; изследвания на рецепторите за андрогени, естрогени и прогестерон; реакция към гонадотропини; метаболизъм на холестерола; изследвания на развитието и функцията на тестисите
- Синоними
- TM-3
02Класификация
- Организъм
- Мишка
- Секс
- Мъж
- Свойства, свързани с растежа
- Привърженик
- Статус на ГМО
- Без ГМО
- Подробности относно статуса на ГМО
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Ниво на биологична безопасност
- 1
03Характеристики
- Морфология
- Епителиален
- Тип клетка
- Клетки на Лайдиг
- Време за удвояване
- приблизително 36 до 48 часа
04Идентификатори
- Източник
- TM3 (каталожен номер 305167 на Cytion)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 10090
- Целозавър
- CVCL_4326
05Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
- Атмосфера за инкубация
37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.
- Добавки
- Допълнете средата с 2,5% FBS, 5% конски серум
- Реагент за дисоциация
- Accutase
- Пресаждане
- Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
- Коефициент на разделяне
- от 1 до 3
- Плътност на засяването
- от 1 до 3 × 10⁴ клетки/см²
- Обновяване на течността
- 2 до 3 пъти седмично
- Възстановяване след размразяване
- След размразяване разпределете клетките при плътност 5 × 10⁴ клетки/см² и изчакайте поне 24–48 часа за прилепване, преди да извършите първата смяна на средата. Поддържайте чувствителността към LH, която зависи от партидата на серума, като проверявате всяка партида FBS за реакцията на cAMP към LH.
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
07Дарител
- Порода / подвид
- BALB/c
- Възраст на донора
- 11 до 13 дни
08Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Необходимо е споразумение за прехвърляне на материали
- Да
