.jpg)
- Tkáň
- Testis
- Nemoc
- Normální Leydigovy buňky varlat (netumorogenní; myš BALB/c)
- Místo metastázy
- Nevztahuje se (normální, netumorogenní testikulární buněčná linie)
- Synonyma
- TM-3
Dokumenty
TM3
Cell line · Číslo výrobku 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Přizpůsobení / Doporučení
- TM3Cell line€430.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
- Buňky TM3 jsou jedinečnou buněčnou linií odvozenou z 11 až 13 dní starých samčích Leydigových buněk myší, která vykazuje adherentní růstové vlastnosti. Tyto buňky nejsou nádorové, protože u imunosuprimovaných myší nezpůsobují nádory, ačkoli mohou vytvářet kolonie v polotuhém médiu. Exprimují gen pro prostaglandin F2a a vyznačují se několika expresními markery včetně luteinizačního hormonu (LH), epidermálního růstového faktoru (EGF) a pozitivních markerů pro androgenní, estrogenní a progesteronové receptory. Pozoruhodným rysem buněk TM3 je jejich reakce na LH, která vede ke zvýšení produkce cAMP; nereagují však na folikuly stimulující hormon (FSH). Udržení reaktivity na LH je závislé na množství séra. Kromě toho mohou tyto buňky v přítomnosti LH metabolizovat cholesterol. Byly testovány a shledány negativními na virus ektromelie (myší neštovice), což zajišťuje vysoký standard bezpečnosti pro laboratorní použití
- Tkáň
- Testis
- Nemoc
- Normální Leydigovy buňky varlat (netumorogenní; myš BALB/c)
- Místo metastázy
- Nevztahuje se (normální, netumorogenní testikulární buněčná linie)
- Aplikace
- Biologie Leydigových buněk; steroidogeneze ve varlatech; signální dráha LH/cAMP; výzkum receptorů pro androgeny, estrogeny a progesteron; citlivost na gonadotropiny; metabolismus cholesterolu; výzkum vývoje a funkce varlat
- Synonyma
- TM-3
02Klasifikace
- Organismus
- Myš
- Sex
- Muž
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Stav GMO
- Bez GMO
- Podrobnosti o statusu GMO
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Epitelové
- Typ buňky
- Leydigovy buňky
- Doba zdvojnásobení
- přibližně 36 až 48 hodin
04Identifikátory
- Citace
- TM3 (katalogové číslo Cytion 305167)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 2,5 % FBS, 5 % koňského séra
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Poměr rozdělení
- 1 až 3
- Hustota výsevu
- 1 až 3 × 10⁴ buněk/cm²
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Zotavení po rozmrazení
- Po rozmrazení naneste buňky na kultivační misky v hustotě 5 × 10⁴ buněk/cm² a před první výměnou média počkejte alespoň 24–48 hodin, aby se buňky přichytily. Udržujte citlivost na LH v závislosti na šarži séra tím, že u každé šarže FBS ověříte reakci cAMP na LH.
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
07Dárce
- Plemeno / poddruh
- BALB/c
- Věk dárce
- 11 až 13 dní
08Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano
