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TM3
ティッシュ
精巣
病気
正常な精巣のライディッヒ細胞(非腫瘍性;BALB/cマウス)
転移部位
該当なし(正常な、非腫瘍性の精巣細胞株)
同義語
TM-3

TM3

Cell line · 製品番号 305167

TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...

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01概要

説明
TM3細胞は、11~13日齢の雄マウスのライディッヒ細胞由来のユニークな細胞株で、接着増殖性を示す。これらの細胞は、半固形培地中でコロニーを形成することはあるが、免疫抑制マウスでは腫瘍を形成しないことから、非腫瘍原性である。プロスタグランジンF2aの遺伝子を発現し、黄体形成ホルモン(LH)、上皮成長因子(EGF)、アンドロゲン、エストロゲン、プロゲステロンレセプターの陽性マーカーなど、いくつかの発現マーカーによって特徴づけられる。TM3細胞の特筆すべき特徴は、LHに対する応答性であり、cAMP産生の増加をもたらすが、卵胞刺激ホルモン(FSH)には応答しない。LH応答性の維持は血清ロット依存的である。さらにLHの存在下では、この細胞はコレステロールを代謝することができる。この細胞はエクトロメリアウイルス(マウス痘)に対して陰性であることが検査で確認されており、実験室での使用において高い安全性が保証されています。
ティッシュ
精巣
病気
正常な精巣のライディッヒ細胞(非腫瘍性;BALB/cマウス)
転移部位
該当なし(正常な、非腫瘍性の精巣細胞株)
用途
ライディッヒ細胞の生物学;精巣におけるステロイド生成;LH/cAMPシグナル伝達;アンドロゲン/エストロゲン/プロゲステロン受容体の研究;ゴナドトロピン反応性;コレステロール代謝;精巣の発達および機能に関する研究
同義語
  • TM-3

02分類

生物
マウス
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
非遺伝子組み換え
GMOのステータスに関する詳細
No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮
細胞の種類
ライディッヒ細胞
倍増時間
約36~48時間

04識別子

引用
TM3(Cytion カタログ番号 305167)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_4326

05取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に2.5% FBS、5% ウマ血清を加える。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
分割比率
1~3
播種密度
1~3 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5 × 10⁴ 細胞/cm²の密度で播種し、最初の培地交換を行う前に、少なくとも24~48時間かけて細胞の付着を待つ。各FBSロットについて、LHに対するcAMP応答性を検証することにより、血清ロットに依存するLH応答性を維持する。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

品種/亜種
BALB/c
ドナーの年齢
11~13日

また、以下が必要になる場合もあります