.jpg)
- Kudos
- Kivekset
- Sairaus
- Normaalit kivesten Leydig-solut (ei-kasvainmuodostavat; BALB/c-hiiri)
- Metastaasikohde
- Ei sovelleta (normaali, ei-kasvainmuodostava kivessolulinja)
- Synonyymit
- TM-3
Asiakirjat
TM3
Cell line · Tuotenumero 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Räätälöinti / Suositukset
- TM3Cell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
- TM3-solut ovat ainutlaatuinen solulinja, joka on johdettu 11-13 päivän ikäisistä hiiren urosten Leydigin soluista ja jolla on tarttuvia kasvuominaisuuksia. Nämä solut eivät ole tuumorigeenisiä, sillä ne eivät aiheuta kasvaimia immunosuppressoituneissa hiirissä, vaikka ne voivat muodostaa pesäkkeitä puolikiinteässä väliaineessa. Ne ilmentävät prostaglandiini F2a:n geeniä, ja niille on ominaista useat ekspressiomarkkerit, kuten luteinisoiva hormoni (LH), epidermaalinen kasvutekijä (EGF) ja positiiviset merkkiaineet androgeeni-, estrogeeni- ja progesteronireseptoreille. TM3-solujen huomattava ominaisuus on niiden vaste LH:lle, joka johtaa cAMP-tuotannon lisääntymiseen; ne eivät kuitenkaan reagoi follikkelia stimuloivaan hormoniin (FSH). LH-reaktiivisuuden ylläpitäminen on seerumin erästä riippuvaista. Lisäksi LH:n läsnä ollessa nämä solut voivat metaboloida kolesterolia. Ne on testattu ja todettu negatiivisiksi ektromelia-viruksen (hiiren rokon) suhteen, mikä takaa korkean turvallisuusstandardin laboratoriokäytössä
- Kudos
- Kivekset
- Sairaus
- Normaalit kivesten Leydig-solut (ei-kasvainmuodostavat; BALB/c-hiiri)
- Metastaasikohde
- Ei sovelleta (normaali, ei-kasvainmuodostava kivessolulinja)
- Sovellukset
- Leydigin solujen biologia; kivesten steroidien tuotanto; LH/cAMP-signalointi; androgeeni-, estrogeeni- ja progesteronireseptoritutkimukset; gonadotropiiniherkkyys; kolesterolin aineenvaihdunta; kivesten kehityksen ja toiminnan tutkimus
- Synonyymit
- TM-3
02Luokittelu
- Organismi
- Hiiri
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- GMO-status
- GMO-vapaa
- GMO-statuksen tiedot
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteeli
- Solutyyppi
- Leydigin solut
- Kaksinkertaistumisaika
- noin 36–48 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- TM3 (Cytionin luettelonumero 305167)
- NCBI-verotunnus
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 2,5 %:lla FBS:ää, 5 %:lla hevosen seerumia
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Jakosuhde
- 1–3
- Kylvötiheys
- 1–3 × 10⁴ solua/cm²
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Sulatuksen jälkeen solut siirretään viljelyastioihin tiheydellä 5 × 10⁴ solua/cm² ja annetaan niiden kiinnittyä vähintään 24–48 tuntia ennen ensimmäistä elatusaineen vaihtoa. Seerumin eräkohtainen LH-herkkyys säilytetään varmistamalla jokaisen FBS-erän cAMP-vaste LH:lle.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
07Lahjoittaja
- Rotua / alalajia
- BALB/c
- Luovuttajan ikä
- 11-13 päivää
08Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
