.jpg)
- Væv
- Testis
- Sygdom
- Normale Leydig-celler i testiklerne (ikke-tumorogene; BALB/c-mus)
- Metastasested
- Ikke relevant (normal, ikke-tumorigen testikelcellelinje)
- Synonymer
- TM-3
Dokumenter
TM3
Cell line · Varenummer 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Tilpasning / Anbefalinger
- TM3Cell line€430.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
- TM3-celler er en unik cellelinje, der stammer fra 11 til 13 dage gamle Leydig-celler fra hanmus, og som udviser adhærente vækstegenskaber. Disse celler er ikke-tumorogene, da de ikke forårsager tumorer i immunsupprimerede mus, selv om de kan danne kolonier i et halvfast medium. De udtrykker genet for prostaglandin F2a og er karakteriseret ved flere udtryksmarkører, herunder luteiniserende hormon (LH), epidermal vækstfaktor (EGF) og positive markører for androgen-, østrogen- og progesteronreceptorer. Et bemærkelsesværdigt træk ved TM3-celler er deres respons på LH, som fører til en stigning i cAMP-produktionen; de reagerer dog ikke på follikelstimulerende hormon (FSH). Opretholdelsen af LH-responsen er afhængig af mængden af serum. I nærvær af LH kan disse celler desuden omsætte kolesterol. De er blevet testet og fundet negative for ectromelia-virus (musekopper), hvilket sikrer en høj sikkerhedsstandard til laboratoriebrug
- Væv
- Testis
- Sygdom
- Normale Leydig-celler i testiklerne (ikke-tumorogene; BALB/c-mus)
- Metastasested
- Ikke relevant (normal, ikke-tumorigen testikelcellelinje)
- Anvendelser
- Leydig-cellebiologi; steroidogenese i testiklerne; LH/cAMP-signalering; undersøgelser af androgen-, østrogen- og progesteronreceptorer; gonadotropinrespons; kolesterolmetabolisme; forskning i testiklernes udvikling og funktion
- Synonymer
- TM-3
02Klassificering
- Organisme
- Mus
- Køn
- Mand
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- GMO-status
- GMO-fri
- Oplysninger om GMO-status
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitelial
- Celletype
- Leydig-celler
- Fordoblingstid
- ca. 36 til 48 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- TM3 (Cytion katalognummer 305167)
- NCBI-skattenummer
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 2,5 % FBS, 5 % hesteserum
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Opdelingsforhold
- 1 til 3
- Såtæthed
- 1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
- Efter optøning udplades cellerne med en tæthed på 5 × 10⁴ celler/cm², og der skal afventes mindst 24–48 timer, indtil cellerne har sat sig fast, før det første medieskift foretages. Sørg for, at LH-responsen afhænger af det enkelte serumparti ved at validere hvert FBS-parti med hensyn til cAMP-respons på LH.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
07Donor
- Race / underart
- BALB/c
- Donorens alder
- 11 til 13 dage
08Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja
