.jpg)
- Audinys
- Sėklidės
- Liga
- Normalios sėklidžių Leydigo ląstelės (netumorogeninės; BALB/c pelė)
- Metastazių vieta
- Netaikoma (įprasta, navikų nesukelianti sėklidžių ląstelių linija)
- Sinonimai
- TM-3
Dokumentai
TM3
Cell line · Prekės numeris 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- TM3Cell line€430.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
- TM3 ląstelės yra unikali ląstelių linija, gauta iš 11-13 dienų amžiaus pelių patinų Leydig ląstelių, pasižyminčių adherentinio augimo savybėmis. Šios ląstelės nėra navikinės, nes nesukelia navikų imunosupresinėms pelėms, nors gali sudaryti kolonijas pusiau kietoje terpėje. Jos ekspresuoja prostaglandino F2a geną ir pasižymi keliais raiškos žymenimis, įskaitant liuteinizuojantį hormoną (LH), epidermio augimo faktorių (EGF) ir teigiamus androgenų, estrogenų ir progesterono receptorių žymenis. TM3 ląstelės pasižymi tuo, kad jos reaguoja į LH, dėl kurio padidėja cAMP gamyba; tačiau jos nereaguoja į folikulus stimuliuojantį hormoną (FSH). LH reaktyvumo palaikymas priklauso nuo serumo kiekio. Be to, esant LH, šios ląstelės gali metabolizuoti cholesterolį. Jos buvo ištirtos ir nustatyta, kad jos yra neigiamos dėl ektromelijos viruso (pelių raupų), todėl užtikrinamas aukštas laboratorinio naudojimo saugumo standartas
- Audinys
- Sėklidės
- Liga
- Normalios sėklidžių Leydigo ląstelės (netumorogeninės; BALB/c pelė)
- Metastazių vieta
- Netaikoma (įprasta, navikų nesukelianti sėklidžių ląstelių linija)
- Paraiškos
- Leydigo ląstelių biologija; sėklidžių steroidogenezė; LH/cAMP signalizacija; androgenų, estrogenų ir progesterono receptorių tyrimai; reakcija į gonadotropinus; cholesterolio apykaita; sėklidžių vystymosi ir funkcionavimo tyrimai
- Sinonimai
- TM-3
02Klasifikacija
- Organizmas
- Pele
- Seksas
- Vyras
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- GMO statusas
- Be GMO
- Išsami informacija apie GMO statusą
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Epitelis
- Ląstelių tipas
- Leydigo ląstelės
- Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
- maždaug nuo 36 iki 48 valandų
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- TM3 (Cytion katalogo numeris 305167)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 2,5 % FBS, 5 % arklių serumo
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Skaidymo santykis
- 1–3
- Sėjos tankis
- nuo 1 iki 3 × 10⁴ ląstelių/cm²
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atkūrimas po atšilimo
- Atšildžius ląsteles, jas išsėkite 5 × 10⁴ ląstelių/cm² tankiu ir prieš pirmąjį terpės keitimą palaukite mažiausiai 24–48 valandas, kol ląstelės prisitvirtins. Užtikrinkite, kad serumo partijos priklausomas jautrumas LH išliktų, patikrindami kiekvienos FBS partijos reakciją į LH pagal cAMP lygį.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
07Donoras
- Veislė / porūšis
- BALB/c
- Donoro amžius
- 11-13 dienų
08Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip
