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- Tecido
- Testículo
- Doença
- Células de Leydig testiculares normais (não tumorigénicas; rato BALB/c)
- Local da metástase
- Não aplicável (linha celular testicular normal, não tumorigénica)
- Sinónimos
- TM-3
Documentos
TM3
Cell line · Número do produto 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Personalização / Recomendações
- TM3Cell line€430.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
- As células TM3 são uma linha celular única derivada de células de Leydig de ratinho macho com 11 a 13 dias de idade, exibindo propriedades de crescimento aderente. Estas células não são tumorigénicas, uma vez que não causam tumores em ratinhos imunossuprimidos, embora possam formar colónias em meio semi-sólido. Expressam o gene para a prostaglandina F2a e são caracterizadas por vários marcadores de expressão, incluindo a hormona luteinizante (LH), o fator de crescimento epidérmico (EGF) e marcadores positivos para receptores de androgénio, estrogénio e progesterona. Uma caraterística notável das células TM3 é a sua resposta à LH, que leva a um aumento da produção de AMPc; no entanto, não respondem à hormona folículo-estimulante (FSH). A manutenção da reatividade à LH é dependente do lote de soro. Além disso, na presença de LH, estas células podem metabolizar o colesterol. Foram testadas e foram consideradas negativas para o vírus da ectromelia (varíola do rato), garantindo um elevado padrão de segurança para utilização em laboratório
- Tecido
- Testículo
- Doença
- Células de Leydig testiculares normais (não tumorigénicas; rato BALB/c)
- Local da metástase
- Não aplicável (linha celular testicular normal, não tumorigénica)
- Aplicações
- Biologia das células de Leydig; esteroidogénese testicular; sinalização LH/cAMP; estudos sobre os recetores de androgénios, estrogénios e progesterona; resposta às gonadotrofinas; metabolismo do colesterol; investigação sobre o desenvolvimento e a função testiculares
- Sinónimos
- TM-3
02Classificação
- Organismo
- Rato
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Estatuto em matéria de OGM
- Sem OGM
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- Epitelial
- Tipo de célula
- Células de Leydig
- Tempo de duplicação
- aprox. 36 a 48 horas
04Identificadores
- Referência
- TM3 (número de catálogo Cytion 305167)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Suplementar o meio com 2,5% de FBS, 5% de soro de cavalo
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Rácio de divisão
- 1 a 3
- Densidade de sementeira
- 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Recuperação após o descongelamento
- Após a descongelação, semeie as células a uma densidade de 5 × 10⁴ células/cm² e aguarde pelo menos 24–48 horas para que adiram antes da primeira troca de meio. Mantenha a capacidade de resposta à LH, que depende do lote de soro, validando cada lote de FBS quanto à resposta do AMPc à LH.
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
07Doador
- Raça / subespécie
- BALB/c
- Idade do dador
- 11 a 13 dias
08Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim
