.jpg)
- Doku
- Testis
- Hastalık
- Normal testis Leydig hücreleri (tümör oluşturmayan; BALB/c fare)
- Metastaz yeri
- Uygulanamaz (normal, tümör oluşturmayan testis hücre hattı)
- Eş anlamlılar
- TM-3
Belgeler
TM3
Cell line · Ürün numarası 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Kişiselleştirme / Öneriler
- TM3Cell line€430.00
Önerilen (en taze parti)
01Genel bilgiler
- Açıklama
- TM3 Hücreleri, 11 ila 13 günlük erkek fare Leydig hücrelerinden türetilen ve yapışık büyüme özellikleri sergileyen benzersiz bir hücre hattıdır. Bu hücreler, yarı katı ortamda koloniler oluşturabilmelerine rağmen, bağışıklık sistemi baskılanmış farelerde tümöre neden olmadıkları için tümörijenik değildir. Prostaglandin F2a genini ifade ederler ve Luteinizan hormon (LH), Epidermal Büyüme Faktörü (EGF) ve androjen, östrojen ve progesteron reseptörleri için pozitif işaretleyiciler dahil olmak üzere çeşitli ifade işaretleyicileri ile karakterize edilirler. TM3 hücrelerinin dikkate değer bir özelliği, cAMP üretiminde artışa yol açan LH'ye yanıt vermeleridir; ancak folikül uyarıcı hormona (FSH) yanıt vermezler. LH duyarlılığının sürdürülmesi serum lotuna bağlıdır. Ayrıca, LH varlığında bu hücreler kolesterolü metabolize edebilir. Ektromelia virüsü (fare çiçeği) için test edilmiş ve negatif bulunmuşlardır, bu da laboratuvar kullanımı için yüksek bir güvenlik standardı sağlar
- Doku
- Testis
- Hastalık
- Normal testis Leydig hücreleri (tümör oluşturmayan; BALB/c fare)
- Metastaz yeri
- Uygulanamaz (normal, tümör oluşturmayan testis hücre hattı)
- Uygulamalar
- Leydig hücresi biyolojisi; testis steroidogenezi; LH/cAMP sinyal iletimi; androjen/östrojen/progesteron reseptör çalışmaları; gonadotropin duyarlılığı; kolesterol metabolizması; testis gelişimi ve işlevi üzerine araştırmalar
- Eş anlamlılar
- TM-3
02Sınıflandırma
- Canlı
- Fare
- Cinsiyet
- Erkek
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- GDO durumu
- GDO'suz
- GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Özellikler
- Morfoloji
- Epitelyal
- Hücre türü
- Leydig hücreleri
- İki katına çıkma süresi
- yaklaşık 36 ila 48 saat
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- TM3 (Cytion katalog numarası 305167)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %2,5 FBS, %5 at serumu ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase
- Alt kültür oluşturma
- Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
- Bölünme oranı
- 1'den 3'e kadar
- Ekim yoğunluğu
- 1 ila 3 × 10⁴ hücre/cm²
- Sıvı değişimi
- haftada 2 ila 3 kez
- Çözülme sonrası toparlanma
- Çözüldükten sonra, hücreleri 5 × 10⁴ hücre/cm² yoğunluğunda plakalara ekleyin ve ilk besiyeri değişiminden önce hücrelerin yapışması için en az 24–48 saat bekleyin. Her bir FBS partisinin LH’ye karşı cAMP tepkisini doğrulayarak, partiye bağlı serum LH duyarlılığını koruyun.
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
07Bağışçı
- Tür / alt tür
- BALB/c
- Bağışçının yaşı
- 11 ila 13 gün
08Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Malzeme Transfer Anlaşması gereklidir
- Evet
