.jpg)
- Kude
- Testis
- Haigus
- Normaalsed munandite Leydigi rakud (mittetuumorigeensed; BALB/c hiir)
- Metastaaside asukoht
- Ei kohaldata (normaalne, mittetumorigeenne munandirakkude liin)
- Sünonüümid
- TM-3
Dokumendid
TM3
Cell line · Toote number 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Kohandamine / Soovitused
- TM3Cell line€430.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
- TM3 rakud on ainulaadne rakuliin, mis on saadud 11-13 päeva vanustest isaste hiirte Leydigi rakkudest, millel on adherentsed kasvuomadused. Need rakud on mittetuumorigeensed, kuna nad ei tekita immuunsupressiooniga hiirtel kasvajaid, kuigi nad võivad moodustada kolooniaid poolkindlas keskkonnas. Nad ekspresseerivad prostaglandiin F2a geeni ja neid iseloomustavad mitmed ekspressioonimarkerid, sealhulgas luteiniseeriv hormoon (LH), epidermaalne kasvufaktor (EGF) ning androgeeni, östrogeeni ja progesterooni retseptorite positiivsed markerid. TM3 rakkude märkimisväärne omadus on nende vastus LH-le, mis toob kaasa cAMPi tootmise suurenemise; nad ei reageeri aga folliikuleid stimuleerivale hormoonile (FSH). LH-reaktiivsuse säilitamine sõltub seerumi kogusest. Lisaks võivad need rakud LH juuresolekul kolesterooli metaboliseerida. Neid on testitud ja leitud, et nad on ektromelia viiruse (hiireviiruse) suhtes negatiivsed, mis tagab kõrge ohutusstandardi laboratoorseks kasutamiseks
- Kude
- Testis
- Haigus
- Normaalsed munandite Leydigi rakud (mittetuumorigeensed; BALB/c hiir)
- Metastaaside asukoht
- Ei kohaldata (normaalne, mittetumorigeenne munandirakkude liin)
- Rakendused
- Leydigi rakkude bioloogia; munandite steroidogenees; LH/cAMP signaaliedastus; androgeeni-, östrogeeni- ja progesterooniretseptorite uuringud; gonadotropiinidele reageerimine; kolesterooli ainevahetus; munandite arengu ja funktsiooni uurimine
- Sünonüümid
- TM-3
02Klassifikatsioon
- Organism
- Hiir
- Sugu
- Mees
- Kasvuvõime
- Järgija
- GMO-staatus
- GMO-vaba
- GMO-staatuse üksikasjad
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteel
- Rakutüüp
- Leydigi rakud
- Kahekordistumisaeg
- umbes 36–48 tundi
04Tunnused
- Viide
- TM3 (Cytioni katalooginumber 305167)
- NCBI maksukood
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 2,5% FBS, 5% hobuse seerumiga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Jagamissuhe
- 1–3
- Külvitihedus
- 1–3 × 10⁴ rakku/cm²
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Taastumine pärast sulamist
- Pärast sulatamist külvake rakud tihedusega 5 × 10⁴ rakku/cm² ja laske neil enne esimest kasvukeskkonna vahetust vähemalt 24–48 tundi kinnituda. Säilitage seerumi partiist sõltuv LH-vastuvõtlikkus, kontrollides iga FBS-partii cAMP-vastust LH-le.
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Annetaja
- Tõug / alamliik
- BALB/c
- Doonori vanus
- 11-13 päeva
08Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah
