.jpg)
- Tissue
- อัณฑะ
- Disease
- เซลล์ Leydig ของอัณฑะปกติ (ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก; หนู BALB/c)
- Metastatic site
- ไม่เกี่ยวข้อง (เซลล์ไลน์ของเซลล์อัณฑะปกติที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก)
- Synonyms
- TM-3
Documents
TM3
Cell line · Product number 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Customization / Recommendations
- TM3Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
- เซลล์ TM3 เป็นสายพันธุ์เซลล์เฉพาะที่สกัดจากเซลล์ Leydig ของหนูเพศผู้ที่มีอายุ 11 ถึง 13 วัน ซึ่งมีคุณสมบัติในการเจริญเติบโตแบบเกาะติด เซลล์เหล่านี้ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก เนื่องจากไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกในหนูที่มีระบบภูมิคุ้มกันบกพร่อง แม้ว่าจะสามารถสร้างโคโลนีในอาหารเลี้ยงเซลล์กึ่งแข็งได้พวกมันแสดงออกของยีนสำหรับพรอสตาแกลนดิน F2a และมีลักษณะเฉพาะด้วยตัวบ่งชี้การแสดงออกหลายชนิด รวมถึงฮอร์โมนลูทีไนซิง (LH), เอพิเดอร์มอล โค้กซ์แฟกเตอร์ (EGF) และตัวบ่งชี้บวกสำหรับตัวรับแอนโดรเจน, เอสโตรเจน และโปรเจสเตอโรน ลักษณะเด่นของเซลล์ TM3 คือการตอบสนองต่อ LH ซึ่งนำไปสู่การเพิ่มการผลิต cAMP อย่างไรก็ตาม พวกมันไม่ตอบสนองต่อฮอร์โมนกระตุ้นฟอลลิเคิล (FSH)การรักษาการตอบสนองต่อ LH ขึ้นอยู่กับชุดตัวอย่างซีรัม นอกจากนี้ ในสภาวะที่มี LH เซลล์เหล่านี้สามารถเผาผลาญคอเลสเตอรอลได้ เซลล์เหล่านี้ได้รับการทดสอบและพบว่าเป็นลบสำหรับไวรัสเอคโตรเมเลีย (เมาส์พ็อกซ์) ซึ่งรับประกันมาตรฐานความปลอดภัยสูงสำหรับการใช้งานในห้องปฏิบัติการ
- Tissue
- อัณฑะ
- Disease
- เซลล์ Leydig ของอัณฑะปกติ (ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก; หนู BALB/c)
- Metastatic site
- ไม่เกี่ยวข้อง (เซลล์ไลน์ของเซลล์อัณฑะปกติที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก)
- Applications
- ชีววิทยาของเซลล์เลอไดก; การสร้างสเตียรอยด์ในอัณฑะ; การส่งสัญญาณ LH/cAMP; การศึกษาตัวรับแอนโดรเจน/เอสโตรเจน/โปรเจสเตอโรน; การตอบสนองต่อโกนาโดโทรปิน; การเผาผลาญคอเลสเตอรอล; การวิจัยการพัฒนาและการทำงานของอัณฑะ
- Synonyms
- TM-3
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- เยื่อบุผิว
- Cell type
- เซลล์ไลดิก
- Doubling time
- ประมาณ 36 ถึง 48 ชั่วโมง
04Identifiers
- Citation
- TM3 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305167)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 2.5% และเซรั่มม้า 5%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Split ratio
- 1 ถึง 3
- Seeding density
- 1 ถึง 3 × 10⁴ เซลล์/ตารางเซนติเมตร
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Post-thaw recovery
- หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์บนจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 × 10⁴ เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ยึดเกาะอย่างน้อย 24–48 ชั่วโมงก่อนเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ครั้งแรก รักษาความสามารถตอบสนองต่อ LH ของเซรั่มแต่ละล็อตโดยตรวจสอบความถูกต้องของล็อต FBS แต่ละล็อตสำหรับการตอบสนอง cAMP ต่อ LH
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
07Donor
- Breed / subspecies
- BALB/c
- Donor age
- 11 ถึง 13 วัน
08Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
