.jpg)
- Audums
- Testis
- Slimība
- Normālas sēklinieku Leydiga šūnas (netumorogēnas; BALB/c pele)
- Metastāžu vieta
- Neattiecas (normāla, netumorogēna sēklinieku šūnu līnija)
- Sinonīmi
- TM-3
Dokumenti
TM3
Cell line · Preces numurs 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Pielāgošana / Ieteikumi
- TM3Cell line€430.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
- TM3 šūnas ir unikāla šūnu līnija, kas iegūta no 11 līdz 13 dienas vecām peļu Leidiga šūnām, kurām piemīt adherentas augšanas īpašības. Šīs šūnas nav tumorogēnas, jo tās neizraisa audzējus imūnsupresētām pelēm, lai gan tās var veidot kolonijas daļēji cietā vidē. Tās ekspresē prostaglandīna F2a gēnu, un tām ir raksturīgi vairāki ekspresijas marķieri, tostarp luteinizējošais hormons (LH), epidermālais augšanas faktors (EGF) un androgēnu, estrogēnu un progesterona receptoru pozitīvi marķieri. Ievērojama TM3 šūnu iezīme ir to reakcija uz LH, kas izraisa cAMP ražošanas pieaugumu; tomēr tās nereaģē uz folikulus stimulējošo hormonu (FSH). LH reaktivitātes uzturēšana ir atkarīga no seruma daudzuma. Turklāt LH klātbūtnē šīs šūnas var metabolizēt holesterīnu. Tās ir pārbaudītas un atzītas par negatīvām attiecībā uz ektromēlijas vīrusu (peļu bakām), tādējādi nodrošinot augstu laboratorijas lietošanas drošības standartu
- Audums
- Testis
- Slimība
- Normālas sēklinieku Leydiga šūnas (netumorogēnas; BALB/c pele)
- Metastāžu vieta
- Neattiecas (normāla, netumorogēna sēklinieku šūnu līnija)
- Pieteikumi
- Leydiga šūnu bioloģija; steroīdu sintēze sēkliniekos; LH/cAMP signālceļš; androgēnu, estrogēnu un progesterona receptoru pētījumi; reakcija uz gonadotropīniem; holesterīna vielmaiņa; pētījumi par sēklinieku attīstību un funkcijām
- Sinonīmi
- TM-3
02Klasifikācija
- Organisms
- Pele
- Sekss
- Vīrietis
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- ĢMO statuss
- Bez ĢMO
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlija
- Šūnu tips
- Leidiga šūnas
- Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
- aptuveni 36 līdz 48 stundas
04Identifikatori
- Atsauce
- TM3 (Cytion kataloga numurs 305167)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildiniet barotni ar 2,5 % FBS, 5 % zirgu seruma
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sadalījuma attiecība
- no 1 līdz 3
- Sēšanas blīvums
- 1 līdz 3 × 10⁴ šūnas/cm²
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atgūšanās pēc atkusņa
- Pēc atkausēšanas izsējiet šūnas ar blīvumu 5 × 10⁴ šūnas/cm² un pirms pirmās barotnes nomaiņas ļaujiet tām vismaz 24–48 stundas piestiprināties. Uzturiet no seruma partijas atkarīgo LH reaģētspēju, pārbaudot katras FBS partijas cAMP reakciju uz LH.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
07Ziedotājs
- Šķirne / pasuga
- BALB/c
- Donora vecums
- 11 līdz 13 dienas
08Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
