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- Tessuto
- Testicolo
- Malattia
- Cellule di Leydig testicolari normali (non tumorigeniche; topo BALB/c)
- Sito metastatico
- Non applicabile (linea cellulare testicolare normale, non tumorigenica)
- Sinonimi
- TM-3
Documenti
TM3
Cell line · Codice prodotto 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Personalizzazione / Suggerimenti
- TM3Cell line€430.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
- Le cellule TM3 sono una linea cellulare unica derivata da cellule Leydig di topo maschio di 11-13 giorni, con proprietà di crescita aderente. Queste cellule non sono tumorigeniche, in quanto non causano tumori in topi immunosoppressi, anche se possono formare colonie in terreno semisolido. Esprimono il gene per la prostaglandina F2a e sono caratterizzate da diversi marcatori di espressione, tra cui l'ormone luteinizzante (LH), il fattore di crescita epidermico (EGF) e marcatori positivi per i recettori di androgeni, estrogeni e progesterone. Una caratteristica notevole delle cellule TM3 è la loro risposta all'LH, che porta a un aumento della produzione di cAMP; tuttavia, non rispondono all'ormone follicolo-stimolante (FSH). Il mantenimento della reattività all'LH dipende dalla quantità di siero. Inoltre, in presenza di LH, queste cellule possono metabolizzare il colesterolo. Sono state testate e sono risultate negative al virus dell'ectromelia (vaiolo dei topi), garantendo un elevato standard di sicurezza per l'uso in laboratorio
- Tessuto
- Testicolo
- Malattia
- Cellule di Leydig testicolari normali (non tumorigeniche; topo BALB/c)
- Sito metastatico
- Non applicabile (linea cellulare testicolare normale, non tumorigenica)
- Applicazioni
- Biologia delle cellule di Leydig; steroidogenesi testicolare; segnalazione LH/cAMP; studi sui recettori degli androgeni, degli estrogeni e del progesterone; risposta alle gonadotropine; metabolismo del colesterolo; ricerca sullo sviluppo e sulla funzione testicolare
- Sinonimi
- TM-3
02Classificazione
- Organismo
- Mouse
- Sesso
- Maschio
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Presenza di OGM
- Senza OGM
- Dettagli sullo stato degli OGM
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Livello di biosicurezza
- 1
03Caratteristiche
- Morfologia
- Epiteliale
- Tipo di cellula
- Cellule di Leydig
- Tempo di raddoppio
- circa da 36 a 48 ore
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- TM3 (numero di catalogo Cytion 305167)
- Codice fiscale NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con FBS al 2,5%, siero di cavallo al 5%
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Rapporto di frazionamento
- da 1 a 3
- Densità di semina
- da 1 a 3 × 10⁴ cellule/cm²
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Recupero post-scongelamento
- Dopo lo scongelamento, seminare le cellule a una densità di 5 × 10⁴ cellule/cm² e attendere almeno 24–48 ore affinché aderiscano prima del primo cambio di terreno di coltura. Mantenere la reattività all’LH, che dipende dal lotto di siero, verificando per ogni lotto di FBS la risposta del cAMP all’LH.
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
07Donatore
- Razza / sottospecie
- BALB/c
- Età dei donatori
- da 11 a 13 giorni
08Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì
