Μετάβαση στο περιεχόμενο
TM3
Ιστός
Όρχεις
Ασθένεια
Φυσιολογικά κύτταρα Leydig των όρχεων (μη καρκινογόνα· ποντίκι BALB/c)
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (φυσιολογική, μη καρκινογόνος σειρά κυττάρων των όρχεων)
Συνώνυμα
TM-3

Έγγραφα

TM3

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305167

TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Τα κύτταρα TM3 είναι μια μοναδική κυτταρική σειρά που προέρχεται από κύτταρα Leydig αρσενικών ποντικών ηλικίας 11 έως 13 ημερών, με ιδιότητες προσκολλημένης ανάπτυξης. Τα κύτταρα αυτά είναι μη ογκογόνα, καθώς δεν προκαλούν όγκους σε ανοσοκατασταλμένα ποντίκια, αν και μπορούν να σχηματίσουν αποικίες σε ημιστερεό μέσο. Εκφράζουν το γονίδιο για την προσταγλανδίνη F2a και χαρακτηρίζονται από διάφορους δείκτες έκφρασης, όπως η ωχρινοτρόπος ορμόνη (LH), ο επιδερμικός αυξητικός παράγοντας (EGF) και θετικοί δείκτες για υποδοχείς ανδρογόνων, οιστρογόνων και προγεστερόνης. Ένα αξιοσημείωτο χαρακτηριστικό των κυττάρων ΤΜ3 είναι η ανταπόκρισή τους στην LH, η οποία οδηγεί σε αύξηση της παραγωγής cAMP- ωστόσο, δεν ανταποκρίνονται στην ορμόνη διέγερσης ωοθυλακίου (FSH). Η διατήρηση της ανταπόκρισης στην LH εξαρτάται από την παρτίδα ορού. Επιπλέον, παρουσία LH, τα κύτταρα αυτά μπορούν να μεταβολίσουν τη χοληστερόλη. Έχουν δοκιμαστεί και έχουν βρεθεί αρνητικά για τον ιό της εκτρωμαλίας (ποντικοπαρωτίτιδα), εξασφαλίζοντας υψηλά πρότυπα ασφάλειας για εργαστηριακή χρήση
Ιστός
Όρχεις
Ασθένεια
Φυσιολογικά κύτταρα Leydig των όρχεων (μη καρκινογόνα· ποντίκι BALB/c)
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (φυσιολογική, μη καρκινογόνος σειρά κυττάρων των όρχεων)
Εφαρμογές
Βιολογία των κυττάρων του Leydig· στεροειδογένεση των όρχεων· σηματοδότηση LH/cAMP· μελέτες των υποδοχέων ανδρογόνων/οιστρογόνων/προγεστερόνης· ανταπόκριση στις γοναδοτροπίνες· μεταβολισμός της χοληστερόλης· έρευνα σχετικά με την ανάπτυξη και τη λειτουργία των όρχεων
Συνώνυμα
  • TM-3

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
Χωρίς ΓΤΟ
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό
Τύπος κυττάρου
Κύτταρα Leydig
Χρόνος διπλασιασμού
περίπου 36 έως 48 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
TM3 (αριθμός καταλόγου Cytion 305167)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_4326

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 2,5% FBS, 5% ορό αλόγου
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 3
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 × 10⁴ κύτταρα/cm²
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, μεταφέρετε τα κύτταρα σε τρυβλία με πυκνότητα 5 × 10⁴ κύτταρα/cm² και αφήστε τα να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24–48 ώρες πριν από την πρώτη αλλαγή του θρεπτικού μέσου. Διατηρήστε την ανταπόκριση στην LH, η οποία εξαρτάται από την παρτίδα του ορού, επαληθεύοντας για κάθε παρτίδα FBS την απόκριση του cAMP στην LH.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Φυλή / υποείδος
BALB/c
Ηλικία δωρητή
11 έως 13 ημέρες