.jpg)
- Vävnad
- Testiklarna
- Sjukdom
- Normala Leydigceller i testiklarna (icke-tumörbildande; BALB/c-mus)
- Metastaseringsställe
- Ej tillämpligt (normal, icke-tumörbildande testikelcellinje)
- Synonymer
- TM-3
Dokument
TM3
Cell line · Produktnummer 305167
TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...
Anpassning / Rekommendationer
- TM3Cell line€430.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
- TM3 Cells är en unik cellinje som härrör från 11 till 13 dagar gamla Leydig-celler från hanmöss och som uppvisar adherenta tillväxtegenskaper. Dessa celler är icke-tumorogena, eftersom de inte orsakar tumörer hos immunosupprimerade möss, även om de kan bilda kolonier i halvfast medium. De uttrycker genen för prostaglandin F2a och kännetecknas av flera uttrycksmarkörer, bland annat luteiniserande hormon (LH), epidermal tillväxtfaktor (EGF) och positiva markörer för androgen-, östrogen- och progesteronreceptorer. En anmärkningsvärd egenskap hos TM3-cellerna är att de svarar på LH, vilket leder till en ökning av cAMP-produktionen; de svarar dock inte på follikelstimulerande hormon (FSH). Upprätthållandet av LH-responsen är beroende av mängden serum. I närvaro av LH kan dessa celler dessutom metabolisera kolesterol. De har testats och befunnits negativa för ectromelia-virus (musepox), vilket garanterar en hög säkerhetsstandard för laboratorieanvändning
- Vävnad
- Testiklarna
- Sjukdom
- Normala Leydigceller i testiklarna (icke-tumörbildande; BALB/c-mus)
- Metastaseringsställe
- Ej tillämpligt (normal, icke-tumörbildande testikelcellinje)
- Ansökningar
- Leydigcellernas biologi; steroidbildning i testiklarna; LH/cAMP-signalering; studier av androgen-, östrogen- och progesteronreceptorer; gonadotropinrespons; kolesterolmetabolism; forskning om testiklarnas utveckling och funktion
- Synonymer
- TM-3
02Klassificering
- Organism
- Mus
- Kön
- Man
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- GMO-status
- Utan genetiskt modifierade organismer
- Detaljer om GMO-status
- No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelial
- Celltyp
- Leydig-celler
- Fördubblingstid
- ca 36 till 48 timmar
04Identifierare
- Källa
- TM3 (Cytion katalognummer 305167)
- NCBI-skattenummer
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4326
05Hantering och odling
- Odlingsmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 2,5% FBS, 5% hästserum
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Uppdelningsförhållande
- 1 till 3
- Såtäthet
- 1 till 3 × 10⁴ celler/cm²
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Återhämtning efter upptining
- Efter upptining ska cellerna odlas ut med en täthet på 5 × 10⁴ celler/cm² och få vidhäfta i minst 24–48 timmar innan det första medielbytet. Säkerställ att LH-responsen är beroende av serumpartiet genom att validera varje FBS-parti med avseende på cAMP-responsen på LH.
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
07Donator
- Ras / underart
- BALB/c
- Donatorns ålder
- 11 till 13 dagar
08Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja
