Przejdź do treści
TM3
Chusteczka
Jądro
Choroba
Prawidłowe komórki Leydiga w jądrach (nie nowotworowe; mysz rasy BALB/c)
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (normalna, nie nowotworowa linia komórkowa jąder)
Synonimy
TM-3

Dokumenty

TM3

Cell line · Numer produktu 305167

TM3 Cells are a unique cell line derived from 11 to 13-day-old male mouse Leydig cells, exhibiting adherent growth properties. These cells are non-tumorigeni...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis
Komórki TM3 to unikalna linia komórkowa pochodząca z 11-13-dniowych komórek Leydiga samców myszy, wykazująca właściwości wzrostu przylegającego. Komórki te są nienowotworowe, ponieważ nie powodują nowotworów u myszy poddanych immunosupresji, chociaż mogą tworzyć kolonie w pożywce półstałej. Wyrażają one gen dla prostaglandyny F2a i charakteryzują się kilkoma markerami ekspresji, w tym hormonem luteinizującym (LH), naskórkowym czynnikiem wzrostu (EGF) oraz pozytywnymi markerami dla receptorów androgenowych, estrogenowych i progesteronowych. Godną uwagi cechą komórek TM3 jest ich reakcja na LH, która prowadzi do wzrostu produkcji cAMP; nie reagują one jednak na hormon folikulotropowy (FSH). Utrzymanie odpowiedzi na LH jest zależne od ilości surowicy. Dodatkowo, w obecności LH, komórki te mogą metabolizować cholesterol. Zostały one przetestowane i uznane za negatywne dla wirusa ektromelii (mysiej ospy), zapewniając wysoki standard bezpieczeństwa do użytku laboratoryjnego
Chusteczka
Jądro
Choroba
Prawidłowe komórki Leydiga w jądrach (nie nowotworowe; mysz rasy BALB/c)
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (normalna, nie nowotworowa linia komórkowa jąder)
Zastosowania
Biologia komórek Leydiga; steroidogeneza w jądrach; szlak sygnałowy LH/cAMP; badania nad receptorami androgenów, estrogenów i progesteronu; reaktywność na gonadotropiny; metabolizm cholesterolu; badania nad rozwojem i funkcjonowaniem jąder
Synonimy
  • TM-3

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
Bez GMO
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
No genetic modification; wildtype mouse Leydig cell line derived from neonatal BALB/c testis by primary culture
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek
Typ komórki
Komórki Leydiga
Czas podwojenia
ok. 36–48 godzin

04Identyfikatory

Źródło
TM3 (numer katalogowy Cytion 305167)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4326

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić pożywkę o 2,5% FBS, 5% surowicy końskiej
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
od 1 do 3 × 10⁴ komórek/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu należy wysiać komórki w gęstości 5 × 10⁴ komórek/cm² i odczekać co najmniej 24–48 godzin, aż komórki przylgną, przed pierwszą wymianą pożywki. Należy zapewnić zależną od partii surowicy wrażliwość na LH poprzez weryfikację każdej partii FBS pod kątem reakcji cAMP na LH.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Rasa / podgatunek
BALB/c
Wiek dawcy
11 do 13 dni

Może się również okazać, że potrzebujesz