NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

La lignée cellulaire NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 est une lignée cellulaire clonale stable dérivée de cellules de rein de rat normal (NRK) par transfection d'un plasmide circulaire. Ce plasmide contient des constructions génétiques codant pour quatre répétitions en tandem de sites de liaison à l'ARN lambda N22 et trois répétitions en tandem d'étiquettes mEGFP (protéine fluorescente verte améliorée monomérique) fusionnées avec le signal de localisation nucléaire M9. Après transfection, les cellules ont été soumises à une sélection de résistance aux médicaments afin de garantir la stabilité des modifications génétiques.

Environ 50 % des cellules de cette lignée clonale stable expriment le marqueur fluorescent 4xλN22-3xmEGFP-M9, ce qui indique une incorporation réussie du plasmide. L'expression de ce marqueur permet la visualisation en temps réel des processus intracellulaires, facilitée par le signal fluorescent robuste de la mEGFP. Le signal de localisation nucléaire M9 garantit que les protéines de fusion exprimées sont transportées vers le noyau, ce qui rend cette lignée cellulaire particulièrement utile pour l'étude du transport nucléaire-cytoplasmique, de la dynamique de l'ARN et de la régulation de l'expression génétique.

Cette lignée cellulaire NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 est précieuse pour les chercheurs qui s'intéressent aux interactions entre les protéines de liaison à l'ARN, au métabolisme de l'ARN et aux mécanismes qui sous-tendent l'importation et l'exportation nucléaires. La présence du marqueur mEGFP permet d'utiliser des techniques d'imagerie avancées telles que la microscopie confocale et l'imagerie de cellules vivantes, ce qui donne un aperçu détaillé de la dynamique spatiale et temporelle des composants cellulaires. Malgré la bigarrure, la lignée cellulaire reste un outil puissant pour disséquer des voies moléculaires complexes et comprendre les fonctions cellulaires à un niveau plus profond.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie