NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 細胞系是一種源自正常大鼠腎臟（NRK）細胞、透過轉染環狀質體所衍生的克隆穩定細胞系。 該質體含有基因構建體，編碼四個串聯重複的 lambda N22 RNA 結合位點，以及三個與 M9 核定位訊號融合的 mEGFP（單體增強型綠色螢光蛋白）標記的串聯重複序列。轉染後，細胞經過抗藥性篩選，以確保基因改造的穩定性。

此克隆穩定細胞系中約有 50% 的細胞會表達螢光標記 4xλN22-3xmEGFP-M9，表明質體已成功整合。 透過 mEGFP 強勁的螢光訊號，該標記的表達可實現細胞內過程的即時可視化。M9 核定位訊號確保所表達的融合蛋白能被運輸至細胞核，使此細胞系特別適用於研究核-細胞質運輸、RNA 動態以及基因表達調控。

此 NRK-4xλN22-3xmEGFP-M9 細胞系對於專注於 RNA 結合蛋白質相互作用、RNA 代謝，以及核內進出口機制之研究人員而言極具價值。 mEGFP 標記的存在使研究人員能夠運用共焦顯微鏡和活細胞成像等先進成像技術，從而深入了解細胞成分的時空動態。儘管存在斑駁現象，該細胞系仍是一項強大的工具，有助於剖析複雜的分子途徑，並更深入地理解細胞功能。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。